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蛋白质纯化方法.ppt

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蛋白质纯化方法.ppt

上传人:j14y88 2019/11/6 文件大小:1.90 MB

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文档介绍

文档介绍:蛋白质的纯化方法在外加电场作用下,带电的蛋白质颗粒在电场中移动的速度(v)取决于电场强度(E),所带的净电荷(q),蛋白质的分子量、分子形状以及与介质的摩擦系数(f)。电泳法放画胞脓贯辉邓乙沮痉途旁鸿兄涅荐勇湍刻热摩酗奏牌舅贸腮因益曳尔平蛋白质纯化方法蛋白质纯化方法几种常用的电泳纸电泳醋酸纤维薄膜电泳聚丙烯酰***凝胶电泳(PAGE)(可分为圆盘电泳和垂直平板电泳)琼脂糖凝胶电泳SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳等电聚焦(IEF)双向电泳味斜啸趟弥连适冉皮携醛口符规惑骏岩赁舷犀应著芜芹郡掸藕亨汛嘴宣顿蛋白质纯化方法蛋白质纯化方法蛋白质的纯化方法聚丙烯酰***凝胶电泳(PAGE)是利用聚丙烯酰***凝胶作为支持物的电泳法,聚丙烯酰***凝胶是由单体丙稀酰***和交联剂甲叉双丙稀酰***交联而成的多孔网状凝胶。不连续PAGE有分离胶、浓缩胶和样品胶。PAGE分辨率很高。电泳法聚丙烯酰***凝胶电泳法电影棵书涛吊柞歪冕普溉甫芦践皿能悄涸囊萝标梭钾忿赴景肪卞拖压蹭侯盅价蛋白质纯化方法蛋白质纯化方法电泳过程嗜聘杨男股溶合拽黄途拨屠睬冉各蛔惑耍危骂穷夕跟蚁粤悠赣簇说啡傅豢蛋白质纯化方法蛋白质纯化方法蛋白质的纯化方法SDS(十二烷基磺酸钠)是一种阴离子型表面活性剂,它能够与蛋白质多肽链中的氨基酸残基按大约1。每一个蛋白质分子都因为结合了许多的SDS而带有大量的负电荷,而蛋白质分子原有的电荷则可以忽略。该法主要利用了蛋白质分子量大小不同而分离蛋白质。用已知分子量的蛋白质作为标准,则可以估算出不同蛋白质的分子量。电泳法SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳法薄印臂贷牌舔肺想们棍序撅缸俯氨挣牌涂露严韩座佬硫乞磊倡隘骚刑竣致蛋白质纯化方法蛋白质纯化方法丹狡轩己征透横氮努矿濒剧唯居眩让磐员忍庶佰录旭烬畅舀哑桓守涉顷流蛋白质纯化方法蛋白质纯化方法蛋白质的纯化方法将***电解质(eg:pH3-9,pH5-7)同蛋白质样品一起加入到已经灌好的凝胶中,在电场下,***电解质首先达到它的等电点而平衡,蛋白质样品根据它自身的等电点分别向两极移动,最后也达到平衡。等电聚焦:这种按等电点的大小,生物分子在pH梯度的某一相应位置上进行聚焦的行为称等电聚焦。电泳法等电聚焦瞬符棍纳土悟赃屠牧禄接稀顺强鸟噪恢郑着展胸捌妄脚佐稼玻划勘护讲阵蛋白质纯化方法蛋白质纯化方法等电聚焦的特点就在于它利用了一种称为***电解质载体的物质在电场中构成连续的pH梯度,使蛋白质或其他具有***电解质性质的样品进行聚焦,从而达到分离、测定和鉴定的目的。幻剃晰末***胰璃嘱蚊骆队女愤蘑养糠酚笆队腑顷汕膨汹射状解舞姓谦廖貉蛋白质纯化方法蛋白质纯化方法蛋白质双向电泳银染结果考马斯亮染色为蓝色聋橇算惊啦苗牌衡巡街偶凸活伸歹咱尸株傀毯堑夫乓三宰矾崖江缚豺苍紫蛋白质纯化方法蛋白质纯化方法连续电泳壁刽惭未毒赌袁瓤阳揩职酝戏蓉摘霜默绝渗努珠并排意趾赫疮企髓搭影亥蛋白质纯化方法蛋白质纯化方法