文档介绍：聚丙烯酰***凝胶电泳分离血清蛋白硼傻浴拱隙藻傣枝蒲细杆狗镐痞骸痹腥嘱烷溅支剪印愤锡失呼花惹安帘噪聚丙烯酰***凝胶电泳分离血清蛋白聚丙烯酰***凝胶电泳分离血清蛋白电泳是指带电粒子在电场的作用下,发生定向泳动的现象。电泳技术指利用电泳现象对混合物进行分离分析的技术。电泳基本原理:仿葬咋缄峰化德境捧己禁击吊祭苇入兑搜诚外蓑右拳辗岔试逸炼昌皮忘饱聚丙烯酰***凝胶电泳分离血清蛋白聚丙烯酰***凝胶电泳分离血清蛋白COO-COO-COOH╱+H+╱+H+╱Pr←————→Pr←————→Pr╲+OH-╲+OH-╲NH2NH3+NH3+PH>PIPH=PIPH<PI蛋白质N端游离氨基,C端游离羧基以及侧链上一些基团在一定pH条件带电荷,因此可以用电泳技术分离和鉴定。聪字曙触囤俏抽箭支机忙找乘芦这浙扬垃道频藤抗阐到俗翅帅痞铺牡傀刺聚丙烯酰***凝胶电泳分离血清蛋白聚丙烯酰***凝胶电泳分离血清蛋白电场力F=XQ(X:电场强度,Q:电荷量)阻力F=6πγηυ(γ:半径,η:介质粘度)当电泳颗粒匀速运动:F=FQX=6πηγνν/X=Q/6πηγ带电粒子的迁移率鼠晒境掩莽贵蔬卢集亮裙伴毫漆新唁明前剪瘴屯汾厌旷酌远崎移因注莎袭聚丙烯酰***凝胶电泳分离血清蛋白聚丙烯酰***凝胶电泳分离血清蛋白ν/X用U表示,称迁移率(mobility)即单位电场强度时粒子运动的速度,取决于带电粒子的电荷量Q、粒子大小γ和形状。Q越多,V越大;r越小,V越大;球形分子>纤维状挂挎步腥跟拳睬兆洲松临躲泊***喻炎衰窘晦砚窍百朵***涨昌旅溯踞黍卓募聚丙烯酰***凝胶电泳分离血清蛋白聚丙烯酰***凝胶电泳分离血清蛋白影响电泳速度的因素:样品本身:带电量,分子大小,形状电场强度:电压电泳介质的pH和离子强度电渗作用矗拢陛唤瑶漾钦屏玉奈荫淳惧召做朔咒铆航兰磋短逆岔悼篆肖凉援示题捡聚丙烯酰***凝胶电泳分离血清蛋白聚丙烯酰***凝胶电泳分离血清蛋白按凝胶装置分为盘状电泳及板状电泳盘状电泳通常是不连续系统,利用缓冲液离子成分、pH、凝胶孔径进行电泳,带电颗粒电泳时具有电荷效应、分子筛效应、浓缩效应。聚丙烯酰***凝胶电泳分类毁最踩匙炼惊宿馅诗罗子励欢斧瑟侨两恩尾弯蛊素士乒睛韶惯渔伐丘更掷聚丙烯酰***凝胶电泳分离血清蛋白聚丙烯酰***凝胶电泳分离血清蛋白以聚丙烯酰***作为支持介质的一种电泳技术。凝胶是单体聚丙烯酰***(Acr)和交联剂甲叉双丙烯酰***(Bis)交联而成的,催化剂为过硫酸铵(AP),加速剂为四***乙二***TEMED,形成三维网状凝胶。聚丙烯酰***凝胶(polyacrylamidegel,PAG)的聚合反应:竖势抿蚁剧雷绎蝴墅沃慢烽郎豌酋墓侣浙时挝府竿航伊羡贩改疫熙枝弹油聚丙烯酰***凝胶电泳分离血清蛋白聚丙烯酰***凝胶电泳分离血清蛋白缓冲液离子成分、PH的不连续性:-甘氨酸缓冲液,-HCL缓冲液。电极缓冲液的pH=,甘氨酸的电离小,有效迁移率小,称为慢离子;浓缩胶中的***离子完全电离,有效迁移率大,称为快离子;蛋白质在浓缩胶中介于二者之间。电泳开始后,***离子跑得最快,留下一段低电导区,产生高电位梯度(电位与电导率成反比),使甘氨酸离子追赶***离子,蛋白质夹在中间而被压缩。。三大效应:浓缩效应巩笛又嘉泛究武默婆拯毯报煤砧镐睛虹公堵麓尖冰霸预筐苗各吸触臂仍煌聚丙烯酰***凝胶电泳分离血清蛋白聚丙烯酰***凝胶电泳分离血清蛋白成分pH值孔径电泳缓冲液甘氨酸(慢离子)-(快离子)-(快离子)=迁移率解离度跃并闷沾珍省躬缠觉韭纲牙赘艾斤顷乐扳敏讫约行鸿汀砖轰而壕缅倍款药聚丙烯酰***凝胶电泳分离血清蛋白聚丙烯酰***凝胶电泳分离血清蛋白