文档介绍：链霉素抗性筛选吸水链霉菌高产农用抗生素菌株彭祎黄永春*蔡延明曹仁林(农业部环境保护科研监测所,天津,300191摘要:-7为出发菌株,经过紫外光照射辅以链霉素抗性筛选后,从62株随机挑选的单菌落中初筛出7株较好菌株,经斜面连续传代3次后复筛,发现5株菌株具有较好的正突变,%,%。关键词:链霉菌,农用抗生素,紫外诱变,,以及通过食物链传递在人体内逐渐蓄积给人体健康造成的危害,已经引起世界各国的广泛关注。农用抗生素作为一类生物农药,它具有使用剂量低,环境相容性好,选择性强的特点[1],因此受到普遍重视。目前已发现的天然抗生素有约三分之二来源于链霉菌[2]。利用链霉菌产抗生素能力与链霉素抗性基因之间的对应关系来定向筛选正向突变株,是目前农用抗生素科研领域的研究热点[3-4]。我们从海南岛土壤中筛选出一株抗生素产生菌,经鉴定为吸水链霉菌(streptomyceshygroscopicus,发现其发酵液中次级代谢产物对多种常见作物病害如白粉病、灰霉病、褐霉病等都具有较好的防治效果,具用良好的农用抗生素应用前景,但此产生菌的原始菌株效价较低,本文在紫外诱变提高菌株产素能力的基础上[5],进一步加入链霉素抗性筛选进行复合诱变提高菌株的产素能力。-7菌株为出发菌株。指示菌为小麦赤霉菌(本试验室收藏。、平板培养基:可溶性淀粉15g;酵母膏4g;K2HPO41g;MgSO4·;复合维生素片:1/4片;;;玉米浆:14mL;,加水至1L,调节pH=。发酵培养基:可溶性淀粉15g;酵母膏4g;K2HPO41g;MgSO4·;复合维生素片:1/4片;;;玉米浆:14mL;,加水至1L,调节pH=。土豆培养基:土豆去皮后切碎,称取400g,放入锅中加入自来水,煮沸1h,经双层纱布过滤后收集土豆汁2000mL,向其中加入葡萄糖40g,琼脂粉40g,分装于三角瓶中,121℃灭菌20min后备用。,洗下孢子,倒入装有玻璃珠的灭菌三角瓶中,于28℃、200r/min振荡25-30min,使孢子分散活化,经灭菌漏斗过滤,制得单孢子悬液,用血球计数板计数,控制孢子浓度为107个/ml,备用。,置于小型脱色摇床上控制80r/min,本研究受中央公益性科研院所基本科研业务费(农业部环境保护科研监测所专项资助。彭祎,1979生,男,重庆人,硕士,长期从事生物农药方向研究;*为通讯联系人紫外照射(功率30W,距离30cm60s。照射后立即避光保存,备用。并同时取未经紫外照射的孢子悬液作CK对照。,并用刮铲涂布均匀,28℃下倒置培养5天。[4],对诱变株进行初筛。待