文档介绍：酶联免疫吸附测定 (Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay,ELISA)免疫学教研室用示踪物质标记抗体或抗原,使其与相应的抗原或抗体反应,使微量的、不可见的反应成为可见的或可测定的。免疫荧光技术用FITC-:测小鼠IgG免疫兔血清中抗小鼠IgG抗体的效价实验材料:包被抗原:小鼠血清待检抗体/一抗:兔抗小鼠IgG酶标抗体/二抗:HRP-驴抗兔IgG聚苯乙烯酶标板水浴箱移液器枪头包被液::5%脱脂奶粉(ALB)稀释液/稀:(磷酸盐缓冲液)洗液:PBST(PBS+%吐温20)显色液:OPD(邻苯二胺)终止液/终:2M硫酸鼠IgG(抗原)兔抗小鼠IgG(一抗)HRP-驴抗兔IgG(二抗)免疫Fc段操作步骤包被:1:5000稀释的正常小鼠血清,4℃过夜→→→洗涤:3次,1min/次加酶标抗体:1:5000稀释的HRP标记的驴抗兔IgG抗血清,37℃20min洗涤:3次,1min/次封闭:5%脱脂奶粉,37℃20min加待检抗体:倍比稀释的兔抗鼠IgG抗血清,37℃30min加底物液显色→洗涤:3次,1min/次→终止液终止显色空白对照无显色待测样品显色明显EEEE底物液每孔加100ul!倍比稀释法与加样AB123456789101112稀释液顺序(每孔100ul)S稀释液一抗试管S1一抗原液AB 123456789101112稀释液2-12号每孔100uL稀释液,1号孔加入200uL一抗,从1号孔吸取100uL加到2号孔中,混匀,从2号孔吸取100uL加到3号孔中,混匀,.....11号孔吸取100uL,丢弃!