文档介绍：01二***亚砜促进δ氨基***戊酸诱导HaCaT细胞光动力学效应生堡廛肤抖塞盔鲤生旦笠垒鲞筮期丛』啦婴越曼鲤丛塑螋垒丛窆晖基亚砜促进一氨基***戊酸诱导细胞光动力学效应夏育民刘小明王首帆熊腊元徐世正【摘要】目的探讨***亚砜对一氨基***戊酸诱导细胞光动力学效应的影响。方法将细胞分成实验组和对照组未加加入一氨基***戊酸并于?避光孵育。采用高效液相色谱荧光法—检测胞内原卟啉?水平用激光共聚焦最微镜观察胞内?荧光强度同时检测细胞增殖噻唑蓝法测定吸光度值与存活率以波长激光照射细胞后继续培养通过流式细胞仪检测细胞凋亡率与坏死率。结果—检测实验组和对照组细胞质内?水平分别为?斗‖和?肛以。观察实验组胞内荧光强度高于对照组吸光度值分别为?、?细胞存活率分别是。照光后实验组和对照组的细胞凋亡率分别为。细胞坏死率分别为和结论可促进一氨基***戊酸所致的细胞光动力学效应。【关键词】二甲亚砜氨基***戊酸血红素角蛋白细胞光化学疗法—。】】咖【】一。蛐—一一?斗‖?‖????矿【一氨基***戊酸介导的光动力疗法是近年发展迅速的一种新型组织消融技术广泛用于皮肤科领域适应证包括非色素细胞性皮肤癌、癌前病变、病毒疣、慢性光化作者单位武汉大学人民医院皮肤性病科通信作者夏育民??论著??性皮肤病等…。局部—疗法的主要优势是对正常组织无明显损害、无系统性不良反应、患者易耐受等但也存在光敏剂前体对组织渗透性较差、激发波长穿透能力不够理想通常选择光源组织穿透深度约。等缺点口】。所以寻求增强局部—疗效的方法成为目前需要解万方数据生堡廛腿整叁壶鲤生里旦筮垒鲞筮窆翅丛』啦墅型丑曼坐笪螋丑丝?窆决的问题。本实验通过研究低浓度二***亚砜对体外培养的角质形成细胞光动力学效应的影响探讨这种促皮肤渗透剂在—技术中的意义。材料与方法一、材料细胞与试剂永生化人角质形成细胞株细胞由天津长征医院刘栋博士惠赠培养基购自美国公司胎牛血清购自杭州四季青生物工程材料有限公司噻唑盐、台盼蓝、青霉素、链霉素及胰酶购自武汉亦新生物技术有限责任公司散剂购自上海复旦张江生物医药股份有限公司购自山西省芮城化工厂分析纯原卟啉??二钠盐分析纯为美国公司产品膜联蛋白碘化丙啶凋亡试剂盒购自杭州联型高效液相色谱仪、荧光检测器为美国科生物技术有限公司。仪器公司产品型激光共聚焦显微镜为德国公司产品流式细胞仪为美国公司产品型全自动酶标仪由芬兰公司生产一型光动力激光治疗仪由桂林兴达光电医疗器械有限公司生产。二、方法细胞培养与分组用含胎牛血清、青霉素、斗咖链霉素的培养基对细胞进行传代培养消化收集指数生长期细胞接种于孔培养板。将细胞分成实验组培养基中含质量浓度的和对照组未加每组孔细胞每孔内细胞密度皆为几溶液量皆为皆加入终浓度为的并于?避光孵育。两组细胞各有孔制备成单层细胞爬片。—检测胞内水平旧】每组细胞取孔用—液配成细胞悬液离心后一?冻融次。涂片镜下观察无完整细胞后离心取上清液置于离心管加流动相混合再次离心并取上清液仙进样检测。色谱条件色谱柱温度—?配制流动相甲醇乙***乙醇流速。设定激发波长发射波长。依据?标准品曲线计算每孔细胞质内?水平取孔样本的平均值为最终结果。激光共聚焦显微镜观察荧光强度取出前述培养板个孔内的细胞爬片轻甩除表面液体进行观察。设定激发波长和发射波长分别为、。’法与台盼蓝染色法分别检测细胞增殖水平与存活率采用’比色法检测增殖水平。选择波长用酶联免疫检测仪测定吸光度