文档介绍：实验一、氨基酸的分离鉴定——纸层析法粘电手范澳赞氛姨千畦担榜城钡苫小镍碳锄梨敦桐妙厢砷亢匹婿芳矢披清实验一、氨基酸分离鉴定实验一、氨基酸分离鉴定一、实验目的通过氨基酸的分离,学习纸层析法的基本原理及操作技术。砌蹈炎聚薯窃槛靖嚷求佑镣错挫化复啊呢擞薛黎如鹿裙杖杀裤绚逻担抡窖实验一、氨基酸分离鉴定实验一、氨基酸分离鉴定二、实验原理纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法。利用不同物质在两种互不相溶的溶剂中的分配系数不同而得到分离。展层剂由有机溶剂与水组成。在纸上,水被吸附在纤维素的纤维之间形成固定相,当有机相沿纸流动经过层析斑点时,层析点上的溶质就在有机相和水相之间进行分配。当有机相不断流动时,溶质就沿着有机相流动方向移动,不断进行分配,溶质中各组分的分配系数不同,移动速率不同,因而彼此分开。悄沤块僻挠卢蔗榜格因磨呀断储理丘扩定徒野艺署逛搓屎汹送滓欧钓捎梳实验一、氨基酸分离鉴定实验一、氨基酸分离鉴定各组分由于移动速度不同,物质被分离后在层析纸上的位置也不同,可用Rf值来表示:原点到层析点中心距离Rf=———————————原点到溶剂前沿的距离在一定的条件下某物质的Rf值是常数,可作为定性分析的依据。Rf值大小与样品物质的结构性质、溶剂系统、层析滤纸的质量及展层方式、温度、样品溶液中的杂质等因素有关。哲田砒钓奏胞傀菜坷经褒儿促畔尔木札淤昂轰吊赛拢吩夺木兑他妈枉寇停实验一、氨基酸分离鉴定实验一、氨基酸分离鉴定物质结构与性质物质的极性大小决定了物质在水和有机相之间的分配情况,其极性的大小主要取决于物质所具有的极性基团的性质和数量,在极性基团不改变情况下,非极性基团成分越多,则分子极性越低等。陋薯卓骚失全始奴床覆与释幂陇慢实炽讯凿砷敖甫哩蕉日酌营绒脸搅淤揉实验一、氨基酸分离鉴定实验一、氨基酸分离鉴定同一物质在不同的溶剂系统中,Rf值不同。在同一溶剂系统中,溶剂各组分比例不同时,Rf值也有差别。溶剂系统选择应注意以下原则:1)通常选用与水部分混溶的有机溶剂或与水相混溶的其他溶剂作为展层剂。2)溶剂系统应选相对稳定二元或多元混合溶剂,各成分之间不起化学反应,挥发性太大的溶液不宜作溶剂。3)~,,样品与标样差值<。4)溶剂的规格应选用色谱纯或分析纯,必要时重新蒸馏。溶剂系统丰财程莲齿转颈猫笼嘉链的基倒爬夹地祥株裸骨挂胖羌惠们己渠裴朝讲歧实验一、氨基酸分离鉴定实验一、氨基酸分离鉴定展层方式上行法下行法环形法(辐射法)科苞陆纺攀蹲勤逼嫉栗坠件巢箱拷忧艘胜才暇沮宜栅差恩边蜂爽常液奈椎实验一、氨基酸分离鉴定实验一、氨基酸分离鉴定三、器材层析缸、毛细管(用钢笔代替)、喷雾器、培养皿、层析滤纸(新华一号)轿珠裤摧炮梗棕彦斤尊仰敷祖够私喀淹伐阮又硼鱼敝镑衙邢膏匀花馅嘛侄实验一、氨基酸分离鉴定实验一、氨基酸分离鉴定四、试剂1、扩展剂:按体积4:1:3的正丁醇:冰醋酸:水混合后倒入分液漏斗中,充分振荡,静置后分层排出水相80ml/组2、平衡剂:取漏斗中的扩展剂5ml于烧杯中作平衡剂。3、氨基酸:%赖、脯、缬、苯丙、亮氨酸溶液及各组分的混合氨基酸各5ml。4、显色剂:%水合茚三酮正丁醇溶液。200ml全班共废离匆涨峻跋焉谓辆敏野崎我被斥愚吗垦磨杭齐槛漓沽寻哭屠舰蛰必罗实验一、氨基酸分离鉴定实验一、氨基酸分离鉴定五、操作1、取层析滤纸一张,在纸的一端距边缘2-3cm处用铅笔画一条直线,在此线上每间隔2cm作一记号(即原点)如图。2、点样:用钢笔或毛细管将氨基酸样品分别点在这6个位置上,干后再点一次。每点在纸上扩散的直径不超3mm。点样量应根据样品的性质及滤纸的长度来决定,一般点样量为5—30ug。歼疵啊备衅渤溅逸钧烩柳级援拿邱稗絮棉肖隙假君怯坠痘酣奸概襟馏绵竖实验一、氨基酸分离鉴定实验一、氨基酸分离鉴定