文档介绍：症状:(一)保留时间变化可能的原因: :::用>25mmol/::稳定进样条件,:采用保护柱(二)保留时间缩短可能的原因::检查泵,::流动相PH值保持在3~::柱恒温(三)保留时间延长可能的原因 ::管路泄漏,更换泵密封圈,:用流动相改性剂,如加三乙***,:同前(二):同前(二):同前(二)5(四)出现肩峰或分叉可能的原因 ::用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%::更换色谱柱,:更换烧结不锈钢,加在线过滤器,:更换进样器转子(五)鬼峰可能的原因 ::每次用后用强溶剂清洗阀,::重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱)***乙酸(TFA)氧化(肽谱):每天新配,(反相):通过变化平衡时间检查水质量,用HPLC级的水(六)基线噪声可能的原因 :(尖锐峰):流动相脱气,(随机噪声):清洗柱,净化样品,:(偶然噪声):采用稳压电源,检查干扰的来源(如水浴等):流动相脱气,加柱后背压(七)峰拖尾可能的原因 ::降低样品量,:清洁样品,***,用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相PH值,(四)4:同前(四)(四)35.:同前(四):连接点降至最低,对所有连接点作合适调整,:用较低腐蚀条件,更换柱,采用保护柱(八)峰展宽可能的原因 ::同(四):::设定时间常数为感兴趣第一峰半宽的10%:增加柱温,:用小体积池,:::进小浓度小体积样品液相色谱常见问题及处理方法HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法1、样品量不足,解决办法为增加样品量2、样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子3、样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改换检测器4、检测器衰减太多。调整衰减即可。5、检测器时间常数太大。解决办法为降低时间参数6、检测器池窗污染。解决办法为清洗池窗。7、检测池中有气泡。解决办法为排气。8、记录仪测压范围不当。调整电压范围即可。9、流动相流量不合适。调整流速即可。10、检测器与记录仪超出校正曲线。解决办法为检查记录仪与检测器,重作校正曲线。为什么HPLC柱柱压过高柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的问题,您可按下面步骤检查问题的起因。1、拆去保护预柱,看柱压是否还高,否则是保护柱的问题,若柱压仍高,再检查;2、把色谱柱从仪器上取下,看压力是否下降,否则是管路堵塞,需清洗,若压力下降,再检查;3、将柱子的进出口反过来接在仪器上,用10倍柱体积的流动相冲洗柱子,(此时不要连接检测器,以防固体颗粒进入流动池)。这时,如果柱压仍不下降,再检查;4、更换柱子入口筛板,若柱压下降,说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质,正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。若柱压还高,请与厂商联系。一般情况下,在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题,SGE提供的Rheodyne7315型过滤器就是解决这一问题的最佳选择。液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么?1、筛板堵塞或柱失效,解决办法是反向冲洗柱子,替换筛板或更换柱子。2、存在干扰峰,解决办法为使用较长的柱子,改换流动相或更换选择性好的柱子如何解决HPLC进行分析时保留时间发生漂移或急速变化漂移现象1、温度控制不好,解决方法是采用恒温装置,保持柱温恒定2、流动相发