文档介绍：色谱法的定性定量分析液相色谱仪的结构、原理及流程高效液相色谱仪的基本组件包括四个部分,即溶剂输送系统、进样系统、色谱分离系统和检测记录及数据处理系统。其工作流程如图所示。贮液槽中的溶剂经脱气、过滤后,用高压泵以恒定的流量输送至色谱柱的入口(如采用梯度洗脱则需用双泵系统输送溶剂,流动相中各溶剂所占比例由梯度装置控制。),欲分析样品由进样装置注入,在洗脱液(流动相)携带下在色谱柱内进行分离,分离后的组分从色谱柱流出进入检测器,产生的电信号被记录仪记录或经数据处理系统进行数据处理,籍以定性和定量。废液罐收集所有流出的液体。1、高压泵按照输送洗脱液的性质可分为恒流泵和恒压泵两类。通常应满足下列要求:。,,有一定的可调范围。,适于进行梯度洗脱操作。,死空间小,易于清洗,能抗溶剂的腐蚀。贮液槽高压输液泵梯度洗脱装置检测器阻尼装置馏分收集器进样装置记录仪2、色谱分离系统包括色谱柱、恒温器和连接管等部分,其中色谱柱是高效液相色谱仪的心脏部件,应对其倍加爱护,小心使用。高效液相色谱法中最常用的色谱柱是由不锈钢合金材料制成的,×103KPa(70Kg/cm2),也可采用厚壁玻璃管。一根好的色谱柱应能耐高压,管径均匀,特别是内壁应抛光为镜面。但由于不锈钢柱管不易加工,所以也有改用不锈钢管内壁涂衬一层玻璃或聚四***乙烯以达到上述目的。为了使固定相易于填充,色谱柱的形状多采用直型柱,柱长通常为10~50厘米,内径为1~7毫米。3、检测器:检测器通常分成两类:通用型检测器和选择性检测器。前者如示差折光检测器等;后者如紫外吸收检测器、荧光检测器、电导检测器等。目前应用范围最广和最常用的两种检测器是紫外吸收检测器和示差折光检测器。4、常用的仪器:Waters515型液相色谱仪该仪器是世界著名的专业液相色谱仪器制造厂家,美国Waters公司的产品。它由515型泵系统及2487型紫外检测器等部分组成,该仪-器具有如下特点:(%RSD)、宽流速范围(~10ml/min)的泵系统,采用非圆齿轮传动,流速平稳精确。,既可单泵使用,也可多泵组成梯度色谱系统。(LCD)屏幕控制,操作简便容易。,从微柱到半制备实验均可很方便的实现。、宽线性范围及测量范围的紫外可见光检测器,并具有先进的编程及双通道检测能力。5、,须精心维护和保养。处于良好工作状态的泵,其基线平稳,保留时间重现性好,梯度洗脱时压力变化缓慢而平稳。要使泵具备良好的操作性能,应该保持泵系统的清洁。具体做法如下:(1)要选择优质的容剂和试剂,,并进行脱气处理。(2)泵开始使用时,一定要用合适的流动相彻底清洗干净。(3)定期检查并更换在线过滤片及有关的垫圈,并经常清洗进液处的微孔滤头。(4)改变流动相时,应避免沉淀产生,以防止泵堵塞。。保养良好的色谱柱应具有很高的塔板数,且仪器基线平稳。色谱柱比较娇气,在平时的工作中须注意以下事项:(1)色谱柱不能够碰撞、弯曲或强烈震荡;安装时,一定要保证阀件或管路的清洁。(2)流动相在使用前必须进行脱气处理