文档介绍：大鼠葡萄糖激酶(GK)说明书活性大鼠葡萄糖激酶(GK)试剂盒使用说明书--上海谷研生物公司专业代理销售本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T15U/L-480U/L使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中葡萄糖激酶(GK)活性。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠葡萄糖激酶(GK)水平。用纯化的大鼠葡萄糖激酶(GK)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入葡萄糖激酶(GK),再与HRP标记的葡萄糖激酶(GK)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的葡萄糖激酶(GK)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠葡萄糖激酶(GK)活性浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(960U/L)×1瓶12孔××1瓶3酶标包被板9标准品稀释液6ml×1瓶1份4样品稀释液10说明书5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张12密封袋1个6显色剂B液6ml×1/瓶标本要求1(标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20?保存,但应避免反复冻融2(不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。5号标准品150µl的原倍标准品加入150µl标准品稀释液480U/L240U/L4号标准品150µl的5号标准品加入150µl标准品稀释液3号标准品150µl的4号标准品加入150µl标准品稀释液120U/L2号标准品150µl的3号标准品加入150µl标准品稀释液60U/L30U/L1号标准品150µl的2号标准品加入150µ:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl,待测样品孔中先加样品稀释液40µl,然后再加待测样品10µl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。:用封板膜封板后置37?温育30分钟。::小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。:每孔加入酶标试剂50µl,空白孔除外。:操作同3。:操作同5。:每孔先加入显色剂A50µl,再加入显色剂B50µl,轻轻震荡混匀,37?:每孔加终止液50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分