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植物组织中还原糖含量的测定.doc

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植物组织中还原糖含量的测定.doc

上传人:q1188830 2019/11/22 文件大小:24 KB

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植物组织中还原糖含量的测定.doc

文档介绍

文档介绍:植物组织中还原糖含量的测定(3,5–二硝基水杨酸法一、实验目的通过本实验,掌握还原糖定量测定的基本原理,学习比色定糖法的基本操作。二、实验原理3,5–二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色物质(即3–氨基–5–硝基水杨酸,该物质在540nm波长处有最大吸收。在一定浓度范围内,还原糖的量与棕红色物质的光吸收值成正比例关系,利用比色法可定量测定样品中的含糖量。三、实验仪器、:25ml刻度试管、离心管或漏斗、三角瓶、容量瓶、刻度吸管、离心机、分光光度计等。:1mg/ml葡萄糖标准液、3,5–:食用面粉四、实验操作步骤1、葡萄糖标准曲线的制作    取7支干燥洁净的25ml刻度试管或大试管,编号,按下表准确加样:管号0123456葡萄糖标准液/.,5–二硝基水杨酸/       将各管摇匀,在沸水浴中加热5min,取出后立即放入盛有冷水的烧杯中冷却至室温,再以蒸馏水定容至25ml,加塞后颠倒混匀。在540nm波长下,用0号管为参比管调零,分别读取各管的吸光度(A540nm。以吸光度为纵坐标,葡萄糖毫克数为横坐标绘制标准曲线。2、,放在小锥形瓶中,先以少量蒸馏水调成糊状,然后加25ml蒸馏水,搅匀,置于50℃恒温水浴中保温20min,然后将锥形瓶中内容物转入一个50mL容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度。充分混合,过滤,滤液即为还原糖待测液。3、样品含糖量的测定分别取2ml还原糖待测液于两支刻度试管或大试管中,然后各加3,5–。其余操作与制作葡萄糖标准曲线时相同。测定各管吸光度。五、实验结果处理以上述还原糖待测液的吸光度平均值,在标准曲线上查出相应的还原糖毫克数。按下式计算样品中还原糖的百分含量。    提取液总体积      还原糖%=(测定时取用体积/样品质量(mg×100      六、实验注意事项:      标准曲线制作与样品含糖量测定应同时进行,一起显色和比色。