文档介绍：大连理工大学硕士学位论文环肽类组蛋白去乙酰化酶抑制剂的设计与合成姓名:王贯申请学位级别:硕士专业:生物化学与分子生物学指导教师:李晓晖20071201大连理工大学硕士学位论文摘要表观遗传学调控失衡与肿瘤的发生密切相关。组蛋白乙酰化和去乙酰化是表观遗传学调控的重要方式之一,在体内由组蛋白乙酰化酶(histoneacetyltramferase,HAT)和组蛋白去乙酰化酶(histoned∞cetyla∞。HDAC)共同调节。抑制组蛋白去乙酰化酶的活性可以诱导肿瘤细胞分化,抑制增殖,促进肿瘤细胞凋亡。因此,以组蛋白去乙酰化酶为靶标,设计合成抗肿瘤药物具有广阔的前景。环肽类组蛋白去乙酰化酶抑制剂具有活性高,特异性好,细胞毒性小等优点。FK228是该类抑制剂中唯一迸入临床II期试验的药物。我们将其作为先导化合物进行结构优化,将巯基作为金属结合区域,考虑巯基在体内不稳定的特点,我们将其设计成为二硫键的形式,以增强其体内的稳定性。在表面识别区域,我们引入H-D-Pro-OH以稳定环肽结构,H-L.Ⅱe-OH和H-。因此我们设计合成了新型环肽类HDAC抑制剂eydo(-Am7(S2Py)--Pro-)。设计的HDAC抑制剂为了增强与酶的作用引入非天然氨基酸。Boc--OH的合成分别以乙酰氨基丙二酸二乙酯和Boc-,利用乙酰转移酶和枯草杆菌蛋白酶进行外消旋体的拆分,%%。结果表明利用Boc-,枯草杆菌蛋白酶拆分的方法更为省时高效,-()-Phe-OH和Boc-L-(3-Me)-Phe-OH以Boe-,利用枯草杆菌蛋白酶进行拆分,收率分别为:%%。产物经过肿Lc、红外光谱、核磁共振、质谱及旋光分析得到表征。环肽HADC抑制剂cyclo(-Am7(S2Py).Aib-Ile-D-Pro.)利用传统的液相方法合成,采用Boc保护氨基酸,C端OBzl保护,.HOBt的合成策略。-OH具有较大空问位阻,这步肽键形成使用HBTU-HOBt为缩合试剂。得到的线性四肽Boc,-Ab7.~-D-Pro.-OBzl,去掉两端保护进行环化,环化试剂为HATU-DIEA,%。侧链经过两步修饰最终得到含有二硫键的环肽类HDAC抑制剂,%。体外酶活抑制实验表明,合成得到的环肽cyclo(-Am7(S2Py)一Aib-Ilc-D-Pro-)对HDACI抑制效果比TSA高,与FK228相当。并且对HDACl和I-IDACA的抑制效果要好于I-IDAC6,这说明该环肽具有较好的选择性。关键词:组蛋白去乙酰化酶抑制剂:环肽;(HDACs)andhistoneacetyltrausferases(HATs)in0111"]lllorcelldifferentiation,-,suchashighactivity,specificity,,introducingH—D—PmoHc衄stabilizethes12-******@ofcyclopeptide,andH-L-lie--OHcanincreasetheactivity。ThuswedesignthelatincyclopeptideHDACinhibitors:cydo(.Am7(S2Py).-Pro-).1nordertostrengthentheinterreacfionwithHI)-proteinsaminoacidsintocyclopeptideHDACinh