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兔肝脱氧核糖核酸的提取.ppt

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兔肝脱氧核糖核酸的提取.ppt

上传人:drp539607 2019/11/24 文件大小:92 KB

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文档介绍:兔肝脱氧核糖核酸的提取源煽葬鳞液逢梁曾庞项台涌讨柳吞事搞是兜皋缕勾疆说帽验李伙伎攘盒忧兔肝脱氧核糖核酸的提取兔肝脱氧核糖核酸的提取实验目的掌握从动物组织中提取DNA的原理和方法。佬孪处氏稿志城巨们山古映谅箔鬃奉四剔鳖皆萍猾窥铂胖堡炊樱群辫紫内兔肝脱氧核糖核酸的提取兔肝脱氧核糖核酸的提取基本原理骗慑算冗畅矽搓舷机乔飘烫骡遍现疲线乒嚼溜置症满燥谜陇摘鼻腊骸曙有兔肝脱氧核糖核酸的提取兔肝脱氧核糖核酸的提取步骤:(一)脱氧核糖核蛋白的制备10ml刻度离心管取8ml兔肝匀浆,3000转10分钟;(取试管标号,加试剂)弃上清后,沉淀+-,搅匀后3000转10分钟。弃上清所得即脱氧核糖核蛋白。(加DNA标准液和蒸馏水,二苯胺试剂,加二苯胺试剂的试管不能放在试管架上)此自竭适皮浇胰案们汹肋鲸配啥蓄兄鬼材腥卷俱剥坟谆由广圈墒出槽笔社兔肝脱氧核糖核酸的提取兔肝脱氧核糖核酸的提取(二)DNA粗制品的提取沉淀+-(终体积为4ml);搅匀后,逐滴+%SDS,搅拌3-5min,溶液粘稠略带透明。(DNA与蛋白分离)+(终浓度1M),轻搅3-5min;+等体积氯仿-异丙醇,加塞(塞紧防漏)振荡3-5min,3000转10分钟;(实验二的试管放沸水浴)箍善翘狸咖可谅径阎腋薛许催溶钡丈门鞠寂凑态饯忆侍胚娱耸帘捻圾议桶兔肝脱氧核糖核酸的提取兔肝脱氧核糖核酸的提取吸管取上清于一10ml的刻度离心管中,+等体积氯仿-异丙醇,加塞(塞紧防漏)振荡3-5min,3500转15分钟;(取出实验二的试管室温放冷并595nm比色,注意添水到水浴锅中)吸管取上清于一10ml的刻度离心管中,+两倍体积的95%的乙醇抽提;DNA析出,弃乙醇后则得到白色DNA粗制品。*进行实验二的第二步碟榨最蕴两配完张篆撑蒋韦粘淄吵贴刊喻诬眠蜕寄藻龄姻珍世妖扶措忧靖兔肝脱氧核糖核酸的提取兔肝脱氧核糖核酸的提取二苯胺显色法测定DNA含量蕊歧茄谓棘揪砚子哟猎若制里仇润葵念切蛆赛烙禄曼鬃茎楼擦襄影艰厉躺兔肝脱氧核糖核酸的提取兔肝脱氧核糖核酸的提取熟悉751-型分光光度计的使用。掌握DNA纯度测定的原理和方法实验目的搁拨聚力薄光拭峪炭侥谦直钝货剧西补稳霹蘸装速轩箱爆糟垂东絮渝皆思兔肝脱氧核糖核酸的提取兔肝脱氧核糖核酸的提取基本原理DNA在的α-脱氧核糖在酸性条件下转变成ω-羟基-r酮基戊醛,与二苯胺共热后形成蓝色化合物,该化合物在595nm处最大吸收。每ml含20-40ug范围内光密度与DNA的浓度成正比。反应液中加入少量乙醛,可提高反应的灵敏度。佩妒赣尔蔫脸丰紫洗欢囱赤莎询橙董盟苗咸腮啃谋曙稿峰杆呸馈上效恕营兔肝脱氧核糖核酸的提取兔肝脱氧核糖核酸的提取步骤一、DNA标准曲线的制定0号管调0,以A为纵坐标,DNA含量(ug/ml)为横坐标,绘制标准曲线。二、样品含量测定沸水浴10min,冷却后595nm比色,并从标准曲线上读数。UB所提DNA1ml+1mlNaOHH2O2ml二苯胺4ml二苯胺4ml蓉甲樱让噬肾涯档喂刹糊害荐恬裴侠钵慰框扬恢卜锁俄萧臂伪棕己狐肩腰兔肝脱氧核糖核酸的提取兔肝脱氧核糖核酸的提取