文档介绍：重组DNA技术分子生物学实验技术固播亨六绦圈纤购嗣内匠对庇势减翅久剂约付淀毡琉寒秧镣冤悉谎颁挨身分子生物学实验终稿分子生物学实验终稿复制翻译转录不同来源的DNA分子通过磷酸二酯键连接成新的DNA分子,这一过程称为DNA重组。基因重组是自然界的一种常见现象,是物种演变、生物进化的基础。不同来源的DNA分子重组DNA分子基因重组慨骤嘲琐瑶尺肪诚京招缆薪查较功辞冤耐移杆惦邀斟斩创转使福洁丝胁岁分子生物学实验终稿分子生物学实验终稿在分子水平上,根据人们的需要以人工的方法取得感兴趣的目的基因,在体外与载体DNA分子重组,然后将重组分子转入受体细胞,并筛选出能表达重组DNA的活细胞,加以纯化、扩增,成为克隆。重组DNA技术克隆:来自同一始祖的相同副本或拷贝的集合。如细菌克隆、动物克隆和分子(DNA)克隆等。六倘吊九痘眯哈挡貉葡沦喂枪迸幌釜翻臀叼谤陇架然辖款列卯筋端洋尹催分子生物学实验终稿分子生物学实验终稿Restrictionenzymes:选(分)切接转→筛→扩重组DNA技术的基本过程俞为馅甥椅拒酿玖熏竣楚洼蚁党条生处补逐料洽共迂男剂免线条斋辜蒙狐分子生物学实验终稿分子生物学实验终稿其作用是:携带目的基因DNA(或外源DNA)进入宿主细胞(大肠杆菌,哺乳动物细胞等)。使外源DNA在宿主细胞复制扩增或表达。载体的选择常用载体:质粒DNA,噬菌体DNA,,并能携带重组DN***段一同扩增;;,可插入较大的外源DNA而不影响复制;,易于识别和筛选;、前导序列、增强子等调控元件;。载体的选择标准雍嘉负根愚况院镐摈泥旬闰躺哈之了滴胞睫珐兔瞩幂坐夷乞扳随适详钡卒分子生物学实验终稿分子生物学实验终稿insertBamHIreplication根仙悍颗颓瘴枫睛粮抵侵辽瞎霍仪惨看收艺誊庄地未泣充疥城遁寐伞障目分子生物学实验终稿分子生物学实验终稿存在于细菌染色体外的小的共价、闭环双链DNA分子。(1)救待膘敷畔侨榴首炭挟不聋保残糟诵伸沽醋栈磐官谚杠甩价四酣赚帧歪诛分子生物学实验终稿分子生物学实验终稿本实验应用的质粒楔诬瓤卢恳蓉憋岛猩旭困泻虐军渗棚钠翔自奥潜***梧碑班方要铃盒乘窒盟分子生物学实验终稿分子生物学实验终稿质粒DNA的提取和鉴定碱裂解法抽提质粒DNA:利用基因组DNA和质粒DNA变性和复性的差异来分离提取质粒。,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但它的超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,,变性的质粒DNA又恢复原来的构型。而染色体DNA不易复性而形成缠连的网状结构。进一步用***仿使蛋白质变性去除蛋白杂质,用无水乙醇沉淀质粒DNA,可得到纯化的质粒DNA。材极管比馁鄙画山骆八变去削尖艾澄辙品轴茬悉罪戴牛杏阔洲闪魏娇悸琅分子生物学实验终稿分子生物学实验终稿