文档介绍：植物生物技术的概念:植物生物技术:指对植物品质和性状进行改造的生物技术植物生物技术核心技术及其在农业生产中的应用创造新材料培育新品种开发功能食品快速繁殖稀有材料材料的指纹分析新基因挖掘、定位、辅助育种等第一章植物组织培养的应用:(1)快速繁殖和规模化生产(2)培养无病毒植株(3)培育转基因植物(4)突变体筛选(5)制***工种子灭菌的方法和原理(1)灭菌方法物理灭菌:高温高压灭菌干热灭菌射线照射灭菌过滤灭菌化学灭菌:熏蒸灭菌消毒液灭菌(2)灭菌原理(a)高温高压灭菌原理:将待灭菌的物品放在一个密封的高压高温灭菌锅内,在121℃高温和每平方厘米1个大气压下,一般持续15-20min,就可杀死一切微生物的营养体及其孢子,适于器皿、工具、衣物和培养基灭菌。(2)过滤灭菌法原理:,使液、气体通过滤膜流入无孔瓶中。培养基的种类和特点目前发展出的培养基有几十种,但常用的有MS、B5、white、N6、SH、KM8P等。(1)MS培养基1962年Murashige和Skoog为培养烟草组织时设计的,是目前应用最广泛的一种培养基。无机盐浓度高,养分平衡,尤其是铵盐和***盐的含量很大它不适合生长缓慢、对无机盐浓度要求比较低的植物,尤其不适合铵盐过高易发生毒害的植物。与MS培养基基本成分较为接近的还有LS、RM培养基,LS培养基去掉了甘氨酸、盐酸吡哆醇和烟酸;RM培养基把***铵的含量提高到4950mg/L,磷酸二氢钾提高到510mg/L。(2)White培养基1943年由White设计的,1963年做了改良。无机盐浓度较低适于生根培养(3)N6培养基1974年,朱至清等学者为水稻等禾谷类作物花药培养而设计的KNO3和(NH4)2SO4含量高,不含钼适于花粉和花药培养。(4)B5培养基1968年由Camborh等设计的含有较低的铵盐,较高的***盐和盐酸硫***素。铵盐可能对不少培养物的生长有抑制作用适合于某些双子叶植物特别是木本植物的生长。(5)SH培养基1972年由SchenkHid和Hidebrandt设计的。它的主要特点与B5相似,不用(NH4)2SO4,而改用NH4H2PO4,是无机盐浓度较高的培养基在不少单子叶和双子叶植物上使用,效果很好。KM8PKaoandMichayluk1975有机成分较复杂,它包括了所有的单糖和维生素,呼吸代谢中的主要有机酸。主要用于原生质体培养培养基的成分及配制方法培养基中包括植物生长必需的15种营养元素和某些生理活性物质,可概括为四大类:1、无机营养物:植物生长发育中非常重要镁(Mg)是叶绿素分子的一部分钙(Ca)是细胞壁的组分之一氮(N)是各种氨基酸、维生素、蛋白质和核酸的重要组成部分此外,铁(Fe)、锌(Zn)和钼(Mo)等是某些酶的组成部分。植物除了碳(C)、氢(H)和氧(O)外,已知还有12种元素对于植物的生长是必需的,它们是氮(N)、磷(P)、钾(K)、硫(S)、钙(Ca)、镁(Mg)、铁(Fe)、锰(Mn)、铜(Cu)、锌(Zn)、硼(B)和铝(Al)。前6种元素需要的数量较大,称之为大量元素或主要元素后6种元素需要的数量较小,称为微量元素或次要元素按照国际植物生理协会的建议,,2、有机营养成分 主要包括碳源(糖类)和维生素类最常用的碳源是蔗糖和葡萄糖使用浓度为2%-5%作为植物生长发育所需的营养物质调节培养基中的渗透压维生素:硫***素(维生素B1)一般认为是一种必需的成分吡哆醇(维生素B6),烟酸(维生素B3),泛酸钙(维生素B5)和肌醇也都能显著地改善培养的植物组织生长状况3、植物生长调节物质(激素)主要有五大天然激素(和人工合成的生长调节物质生长素):植物五大天然激素的合成部位吲哚乙酸分生组织、种子细胞分裂素根尖赤霉素生长的种子脱落酸、乙烯成熟、衰老和环境条件4、其他附加物不是植物生长所必需的,但对细胞生长有益(1)凝固剂琼脂(agar)是固体培养基的必要成分,琼脂是一种由海藻中提取的高分子碳水化合物,本身并不提供任何营养琼脂能溶解在热水中,成为溶胶,冷却至40℃即凝固为固体状凝胶。(2)抗生素抗生物质(antibiotic),包括青霉素、链霉素、庆大霉素等,用量在5—20mg/L之间添加抗生物质可防止菌类污染,减少培养中材料的损失,尤其是快速繁殖中,常因污染而丢弃成百上千瓶的培养物,采用适当的抗生素便可节约人力、物力和时间(3)活性炭活性炭为木炭粉碎经加工形成的粉沫结构,它结构疏松,孔隙大,吸水力强,有很强的吸附作用—l0g/L活性炭(activecarbon)可以降低组织培养物的有害代谢物浓度,对细胞生长有利培养基的制备1、母液的配制 配制母液有两个好处:可减少每次配制称量药品的麻烦减少极微量药品在每次称量时造成的误差(1)大量元素母液:可配成10倍母液,用时每配1000ml培养基取100ml母