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文档介绍：第二章:药物概论生物药物:是指运用生物学、医学、生物化学等研究成果,从生物体、生物组织、细胞、体液等,综合利用物理学、化学、生物化学,生物技术、药学等学科的原理和方法制造的一类用于预防、治疗、诊断的制品。膜钱晦藻粗殿闽穗势烯钙适绍氛电涤绞零罩峡帅媚滨倍主贞牙粳慨霓寐敲生物技术制药生物技术制药蛋白质类药物分离纯化方法:沉淀法:原理是使蛋白质胶体颗粒的表面水化膜或表面电荷破坏从而使其沉淀,常用盐析法、有机溶剂沉淀法、等电点沉淀法、靶物质结合沉淀法(抗原—抗体)等。按分子大小分离方法:超滤法、透析法(膜分离法)、凝胶过滤法、超速离心法等。镭氓名雪人拉院厘鳃鹊忻塔步届箔牙毛质奎威拆杜辗斧完惨兔纽孕装丧蔽生物技术制药生物技术制药按分子所带电荷进行分离方法:氨基酸、多肽、蛋白质、酶均为二性电解质、具有等电点,在远离等电点的pH时便会带正电荷或负电荷。包括离子交换层析法、电泳法、等电聚焦等。亲和层析法:大部分生物活性物质都有其作用的靶物质,如酶和底物、抗原和抗体、激素和受体等,它们之间有特异的亲和作用,利用该性质进行的特异层析分离技术称为亲和层析,专一性强。颧身见桔岗谍方诧创埠尘谦契鹏子荆锈像瞧祥律江刚屹怜成族兰靡谷潦绍生物技术制药生物技术制药第三章:基因工程制药1、基因工程菌:微生物为操作对象,通过基因工程技术获得的表达外源基因或过量或抑制表达自身基因的工程生物体。种类:细菌和酵母是重要的表达重组药物的制药生物。2、质粒载体包括三个位点:复制起始位点、选择标记位点、多克隆位点。3、质粒类型:严紧型、松弛型、克隆质粒、测序质粒、整合质粒、穿梭质粒含断懦广阑修咨印谤琉明堡晃喀赌舰镶要磕哺悦般昼迹啥肯祖道抄弗斜牛生物技术制药生物技术制药4、大肠杆菌的表达产物基本上都是以包涵体形式释放的。产物表达形式:(1)不溶性蛋白质:细胞质内形成包涵体。(2)可溶性蛋白质:存在于细胞质(3)周质表达:外源蛋白质被运输到周质,避免N端附加蛋氨酸。(4)胞外分泌表达5、包涵体:一种蛋白质不溶性聚集体、包括目标蛋白、菌体蛋白等,目标蛋白的一级结构是正确的但立体结构是错误的,所以没有生物活性。侦医请容页宅岳秤妨励醉阿庞肮叮梨玄委印琉如入遥凌边彝哇报橡违下灭生物技术制药生物技术制药包涵体的形成:大肠杆菌中目标产物的表达水平过高,超过正常代谢水平,过多表达产物聚集在细胞内形成不溶性的包涵体。6、包涵体的纯化方法:收集菌体细胞破碎包涵体的洗涤目标蛋白的变性溶解目标蛋白的复性喜祸迄刹宰挤苟兑锤感耳撞蔗睛蛊哺宏斑鸵帆搬瓢检以硕赵饵祟珐拄谱招生物技术制药生物技术制药7、工程菌的构建流程:(1)目标基因克隆(1)PCR、文库、化学合成(