文档介绍：ABO血型鉴定根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原,将血型分为A型、B型、AB型及O型4种。可利用红细胞凝集试验,通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型,是用己知抗一A和抗一B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或/和B抗原;所谓反定型,是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗一A或/和抗一B。,受检者血液制成5%红细胞盐水悬液使用。3标本出现中度溶血者,为不合格标本,不能用于检测。仪器、试剂、校准品、质控品、以及其他所需物品离心机,显微镜。抗A、抗B血型定型试剂(单克隆抗体):长春博德生物技术有限责任公司产品注册号:国药准字S1096088k包装:抗A、抗B各1支/盒,塑料瓶,规格:10ml/支。储存要求:2°C〜8°C避光保存,主要成分:分泌抗人A型和抗人B型血型原单抗的杂交瘤细胞培养上清液并补加一定量小鼠腹水抗体。/%的生理盐水:山东齐都药业有限公司。操作步骤:试管法1取洁净小试管(内径10mmX60mm)3支,分别标明抗一A、抗一B和抗一A十B,用滴管分别加抗一A、抗一B和抗一A十B分型血清各1滴(约50ul)于试管底部,再以滴管分别加入受检者5%红细胞盐水悬液1滴,混和。2另取洁净小试管(内径10mmX60mm)3支,分别标明A、B和O细胞。用滴管分别加入受检者血清1滴于试管底部,再分别以滴管加入A、B和O型5%试剂红细胞悬液1滴,混和。3立即以1000r/min离心3min。4将试管轻轻摇动,使沉于管底的红细胞浮起,先以内眼观察有无凝集(或溶血)现象。如内眼不见凝集,应将反应物倒于玻片上,再以低倍镜检查。5观察结果时既要看有无凝集,更要注意凝集强度,此有助于A、B亚型、类B或cisAB的发现。6凝集强度判断标准4+红细胞凝集成一大块,血清清晰透明。3+红细胞凝集成数小块,血清尚清晰。2+红细胞凝块分散成许多小块,见到游离红细胞。1+肉眼可见大颗粒,周围有较多游离红细胞。±镜下可见数个红细胞凝集在一起,周围冇很多游离红细胞。MF混合凝集外观(mixedfield)是指镜下可见少数红细胞凝集,而极大多数红细胞仍呈分散分布。・表示阴性,镜下未见凝集,红细胞均匀分布。玻片法1取清洁玻片1张(或口瓷板1块),用蜡笔划成方格,标明抗・A、抗・B和抗・AIB,分别用滴管滴加抗・A、抗・B和抗-AIB分型血清1滴于标明的方格内,再各加受检者2%红细胞悬液1滴,混和。2另取洁净玻片一张(或口瓷板1块),用蜡笔划成方格,标明A细胞、B细胞和0细胞,用滴管各加受检者血清1滴,再分别用滴管滴加A、B和O型试剂红细胞悬液1滴。3将玻片(或白瓷板)不断轻轻转动,使血清与细胞充分混匀,连续约15min,先以肉眼观察有无凝集(或溶血)反应;再在低倍镜下观察结果。5、结果判定ABO血型正反定型结果分型血清+受检者红细胞受检者血型 受检者血清+试剂红细胞抗・A抗・B抗・A十BA细胞B细胞0细胞+-+A-+--++B+--■■-0++・4-&:+++为凝集;■为不凝集。AB■--注意事项:1分型血清必须为批批检试剂,且在有效期内使用;质量性能符合要求。试剂开封后必须贴上开封日期、开封人标签,用毕后应放置冰箱保存,以免细菌污染。试剂开封后有效期为一周。2试剂红细胞以3个健康者同型新鲜红细胞混和,用生