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天冬氨酸氨基转移酶测定试剂培训材料.doc

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天冬氨酸氨基转移酶测定试剂培训材料.doc

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文档介绍

文档介绍:天冬氨酸氨基转移酶测定试剂培训材料天冬氨酸氨基转移酶测定试剂盒培训材料一初级部分:(原理、临床意义、规格)天冬氨酸氨基转移酶(英文名称:AspartateAminotransferase)简称AST,推荐的连续监测法。临床意义:天冬氨酸氨基转移酶的测定是医院临床检测人体生化肝功能的主要项目,也是肝炎诊断的重要指标之一,天冬氨酸氨基转移酶的测定对肝脏疾病诊断具有重要的意义。原理:推荐法为基础。反应原理为:ASTL-天冬氨酸+α-***戊二酸草酰乙酸,L-谷氨酸,+苹果酸脱氢酶草酰乙酸,NADH+HL-苹果酸,NAD+HO2上述偶联反应中,NADH的氧化速率与标本中酶活性呈正比,在340nm波长处,NADH呈现特征性吸收峰,而NAD则没有。因此,可在340nm监测吸光度的Δ/min),计算出AST的活性单位。下降速率(-包装规格及适用仪器:类型货号规格适用仪器AS1091120ml×5通用单试剂适用于半自动和全自动生化分析仪AS1091275ml×4AS10920R160ml×4R260ml×2日立7170、7080、7180、7600、Olympus日立专用包装AS10930R150ml×4R250ml×2日立7020AS10940R180ml×2R240ml×2日立7060、7150、岛津、Abott2000贝克曼AS10950200test×2贝克曼CX系列生化仪(封闭通道)东芝AS10960R150ml×4R250ml×2东芝30FR/40FR二中级部分:(试剂特性、测定参数、常见问题解答)易出现的问题及解答:测定参数:手工法参数:反应温度37?反应主波长340nm反应副波长405nmR1?R22?1试剂量?样本量15?、7080参数:双试剂:主波长340nm副波长405nmR1200μlR2100μl样品量20μl测定方法速率A反应时间10min第一测光点21最后一测光点30反应方向下降反应单试剂:主波长340nm副波长405nm试剂量225μl样品量15μl测定方法速率A反应时间10min第一测光点5最后一测光点11反应方向下降反应结果计算:ΔA/min=A-A21ΔA/min×TV×1000ALP(U/L)==ΔA/min×K6(22×SV×PA=第一测光点的吸光度1A=最后一测光点的吸光度2TV=总反应体积(ml)SV=样品体积(ml)6(22=340nm处NADH毫摩尔消光系数P=比色杯光径理论因子数K=2572由于各厂家AST试剂配方有所不同,因此在第一次使用时,请先用标准品进行定标,以定标得出的实际因子数K为准。质量控制:为保证测试结果可靠,每批样品测试时,同时测定质控血清。标本的收集与处理:血清或用EDTA、肝素抗凝的血浆均不应溶血。AST在4?下至少可稳定7天。储存血清AST的活性会缓慢增高,建议采血当天测定AST活力。/LNADHL-天冬氨酸260mmol/,-***戊二酸14mmol/:温度37?(U/L)37?(μkat/L))女性0,250,,300,。主要技术参数: