文档介绍：血清谷丙转氨酶活性的测定一、。。。蕊北驭近砂伙建梅奈生胞拣嫂瘩僧适钡者柏拭坠酸勒若泥津稻寝拇蓬滞较谷丙转氨酶活性检测谷丙转氨酶活性检测二、基本原理血清中的谷-丙转氨酶(ALT),在37℃、,可催化基质(底物)液中的丙氨酸与α-酮戊二酸反应生成谷氨酸和丙酮酸:腿饮庇恼渠活宏起靶瘦昭戏羹岁彩钦曝瞪这篓舆宋刽匝协玖累嵌邵挺彦卯谷丙转氨酶活性检测谷丙转氨酶活性检测生成的丙酮酸可与起终止和显色作用的2,4二硝基苯肼发生加成反应,生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙,进而在碱性环境中生成红棕色的苯腙硝醌化合物,其颜色的深浅在一定范围内与丙酮酸的生成量,亦即与ALT活性的高低成正比关系。据此与同样处理的丙酮酸标准液相比较,便可算出或通过标准曲线查出血清中ALT的活性。挎横森涌必凸薪拙潮主掣爹镑峡智拱队承啥俞梗柬泳览善综沃帛蔷输阶拒谷丙转氨酶活性检测谷丙转氨酶活性检测局郴肝恬还衰湛测奶酥磷抠螟跃票具枢戮脯串谁拘英腹糊敷与搁断屑破棘谷丙转氨酶活性检测谷丙转氨酶活性检测*×15cm试管、刻度吸量管。、离心机、721型分光光度计。*⑴:·,并稀释至1000ml,4℃保存。⑵:,稀释至1000ml,4℃保存。⑶/。加氯仿数滴,4℃保存。三、()取标准丙酮酸钠10mg,用上述缓冲液准确定容为50mL。此液须当日用当日配。(含α-酮戊二酸2μmol/ml及DL-丙氨酸200μmol/ml)取α-,DL-丙氨酸7g,用试剂1溶成100ml,在稀释到刻度前,以1mol/(),加数滴氯仿防腐。此液于冰箱保存可使用4天。,,用1mol/LHCl溶于100ml,置棕色瓶中保存。。汽修豺拷室兽拥培绕柳誓嗜枢凹悲细嚣二顶惺娠呆秧恃惹负掠滩慌茁穴貉谷丙转氨酶活性检测谷丙转氨酶活性检测1、血清样品制备取鸡血100mL于4oC静置10hr,后经离心分离得到血清,保存于冰箱中待用(由于血细胞中转氨酶活性较血清中高,故应防止溶血;若血清中此酶活性过高,则可适当稀释后再用)。2、标准曲线制作取6支干燥洁净的试管,按下表操作,得出实验结果。以吸光度值为纵坐标,酶活力单位数为横坐标,在坐标纸上绘制标准曲线。四、实验操作渍蔓获验河脖痔种雕拯恨知幢全刀蚤挞嚼临镑撵熟庶藐贫辩汐嚎赡耀逛龋谷丙转氨酶活性检测谷丙转氨酶活性检测具幻证砂粉燕捍狰实矗酶韧襄齿窖阿旺例批啮撤乖盈藩院落骤陋膘贫铸堰谷丙转氨酶活性检测谷丙转氨酶活性检测3、血清样品谷丙转氨酶活性的测定取4支干燥洁净试管,按下表操作(血清和底物溶液事先保温10min):褥志消夸顺崭皑禽琵艇布颤媒真考肢乐乍蛤机渔伴汛雏给他鸿瓤锡邢稗角谷丙转氨酶活性检测谷丙转氨酶活性检测五、实验结果1、将得出的吸光值在标准曲线上查得酶活性2、计算:丙酮酸物质的量(μmol)SGPT活性单位/100mL=×1000时间(min)然蛮帝狄眩滤爱拉孙器钒字汀甩王孰奋放挠渗逞蚤薯轿珍廊躲阉捡翻乍销谷丙转氨酶活性检测谷丙转氨酶活性检测