文档介绍：嗜热微生物中获取耐乙醛变性醛缩酶第9卷第5期2010年9月杭州师范大学(自然科学版)JournalofHangzhouNormalUniversity(NaturalScienceEdition):.1674—,杜鹏飞,裴晓林,吴慧丽,谢开林,王秋岩(杭州师范大学生物医药与健康研究中心,浙江杭州310012)摘要:在催化他汀药物中间体合成中,(DERAGth),该蛋白质序列长度为223aa,,,,最适温度为6O?.在4O一1OO?保温10min的结果表明,DERAGth具有较好的热稳定性,在6O?,该酶在300mmol乙醛中25?保温2h,,:2一脱氧一【)I核酸一5一磷酸醛缩酶;连续醛缩;嗜热酶;乙醛抗性中图分类号:Q819文献标志码:A文章编号:1674-232X(2010)05-0372—070前言2一脱氧一D一核糖一5磷酸醛缩酶(2-deoxy-D-ribose5-phosphatealdolase,DERA,)是一种特殊的裂解酶,参与多种微生物的DNA代谢路径,可以催化其天然底物乙醛和【)_甘油醛一3一磷酸可逆的醛缩反应形成D-2,,这个特点使它成为合成多种稀有糖和糖衍生物的有力工具口].Wong和其同事在1994年报道了”醛缩酶催化三分子乙醛的不对称醛缩反应”.这个反应能够在其合成产物中形成新的碳碳键并且可以引入最多两个手性中心,其内酯产物可以被用作重要的他汀中间体使用(见反应式1[2]).今天,作为降血脂的3-hydroxy3一methylglutary(HMG)一CoA还原酶抑制剂的他汀类药物是世界上最为畅销的全合成药物,,四碳的中间产物形成是可逆的,在这个中间产物与另一分子乙醛第二次醛缩时,因为最后形成了环化内酯,,可以用价格低廉的乙醛作为原料,,,,Klebsiellapneumoniae,Lactobacillusplantarum,Salmonellatyphimurium,usmutansGS一5,,Aeropyrumpernix,Pyrobaculum收稿日期:2010—05—12作者简介:李铖璐(1984一),男,浙江金华人,助理实验师,-mail:******@:壬秋岩(1975一),男,吉林长春人,助理研究员,-mail:******@,等:嗜热微生物中获取耐乙醛变性醛缩酶373nPr0philum和Thermotogamaritime的DERA:”].另有报道采用理性设计,设计了一个带有$238D突变的醛缩酶突变体,这个突变体可以接纳新的醛类分子作为它的底物,可以方便的与后续母环进行对接,,在放大反应中,该酶对乙醛衍生物表现出比大肠杆菌醛缩酶更好的耐受性[,,尽管人们在醛缩酶耐乙醛变性的功能改进上,已取得很大进步,但仍然需要更多的途径,,尤其是耐有机溶剂的稳定性,在工业中特别是在精细化工和医药行业中的应用,一直是受到关注的热点问题_1?].来源于嗜热微生物的酶具有很高的热稳定性,,在高温