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饮用水微生物限度检查操作规程.doc

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文档介绍:饮用水微生物限度检查操作规程.doc题目 饮用水微生物限度检查法操作规程编号DY10SA00705制订人审核人批准人日期:日期:日期:颁发部门 生效日期:复制备份3分发部门(份数)目的:使生活饮用水检查操作规范化、标准化。范围:牛活饮用水微牛物限度检查职责:生活饮用水微生物限度检查操作人员引用标准:GB5749-2006中国药典2015年版四部内容5.1主要设备、仪器及用具5.1.1牛化培养箱、恒温水浴锅、0.45刚滤膜及薄膜过滤器、灭菌柜、乙醇灯等。5.1.2玻璃器皿锥形瓶、培养皿(直径90mm)、量筒、试管、刻度吸管等。刻度吸管、量筒用前应洗涤干净。吸管口上端距0.5cm处塞入约2cm适宜疏松的棉花,置不锈钢盒内。锥形瓶、量筒、试管均应加硅胶塞,再用牛皮纸包扎。玻璃器皿,均于高压蒸汽121°C灭菌30min,备用。5.2操作步骤:5.2.1需氧菌总数:采用薄膜过滤法处理。5.2.2ffl10ml无菌水,润湿滤膜,取供试液10ml2份,分别过滤;取出滤膜,菌面朝上,贴于R2A琼脂培养基上;523用10ml无菌水,照上述薄膜过滤法操作,作为阴性对照;524将上述计数平板倒置于30-35°C培养箱中培养5天,逐日观察菌落生长情况,点计菌落数并报告;标准规定:每lml需氧菌总数不得过lOOcfuo525菌数报告规则以lml供试液的菌落数报告菌数;若滤膜上无菌落生长,以VI报告菌数(每张滤膜过滤lml供试液)。5.3耐胆盐革兰氏阴性菌标准规定:不得检出。5.3.1菌种 试验用菌株的传代次数不得超过5代(从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代),并采用适宜的菌种保藏技术进行保存,以保证试验菌株的生物学特性。大肠埃希菌 [(B)44102]铜绿假单胞菌 [(B)10104]5.3.2菌液制备接种大肠埃希菌和铜绿假单胞菌的新鲜培养物至胰酪大豆腺琼脂培养基中,30一35°C培养18一24小时;上述培养物用0.9%无菌***化钠溶液制成含菌数不大于lOOcfu的菌悬液。菌悬液在室温下放置应在2小时内使用,若保存在28C可在24小时内使用。5.3.3操作步骤5.3.3.1供试液制备和预培养取供试品10ml3份,分别接种至100ml胰酪大豆腺液体培养基中,混匀,制成1:10的供试液。一份作为供试品,一份加入不大于lOOcfu的大肠埃希菌菌悬液1ml,—份加入不大于1OOcfu的铜绿假单胞菌菌悬液1ml,作为阳性对照。取10ml灭菌水同法操作,作为阴性对照在20-25°C培养,培养约2小时。5.3.3.2定性试验分别取上述10ml供试品的预培养物接种至lOOml肠道菌增菌液体培养基中,30-

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