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用于检测人hla-b27基因的引物、探针、荧光pcr试剂盒和方法.doc

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用于检测人hla-b27基因的引物、探针、荧光pcr试剂盒和方法.doc

上传人:q1188830 2019/12/12 文件大小:561 KB

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文档介绍

文档介绍:SooPAT用于检测人HLA-B*27基因的引物、探针、荧光PCR试剂盒和方法申请号::2014-12-10申请(专利权人苏州旷远生物分子技术有限公司地址215500江苏省苏州市常熟市高新技术开发区金都路8号发明(设计人王进吴梦华吴子侠赵小龙彭飞主分类号C12Q1/68((((公告号104450913A公开(公告日2015-03-25专利代理机构南京知识律师事务所32207代理人汪旭东(10申请公布号(43申请公布日(((((71申请人苏州旷远生物分子技术有限公司地址215500江苏省苏州市常熟市高新技术开发区金都路8号(72发明人王进吴梦华吴子侠赵小龙彭飞(74专利代理机构南京知识律师事务所32207代理人汪旭东(54发明名称用于检测人HLA-B*27基因的引物、探针、荧光PCR试剂盒和方法(57摘要本发明提供用于人HLA-B*27等位基因检测的引物、探针、荧光PCR试剂盒和检测方法,根据“等位基因特异PCR”原理,在实时荧光定量PCR技术平台上检测人白细胞抗原HLA-B*27等位基因。(.(19中华人民共和国国家知识产权局(12发明专利申请权利要求书1页说明书8页序列表3页附图1页(104450913A(-B*27等位基因的检测引物及其相应探针,其特征在于所述检测引物及探针根据HLA-B*27等位基因特异位点设计,序列如下所示:正向引物:HLA-B*27F:5’-GGCTACGTGGACGACACGCTGT-3’反向引物:HLA-B*27R:5’--3’荧光探针:TM-HLA-B*27:5’荧光基团-5’GCG-3’淬灭基团。-B*27等位基因的内控引物对及相应荧光探针,其特征在于所述内控引物对及相应荧光探针的序列如下所示:内控引物对:正向引物:GAPDHF:5’-GCTGCTTTTAACTCTGGTAAAGTG-3’反向引物:GAPDHR:5’-ATGTAGTTGAG-3’内控荧光探针:荧光探针:TM-GAPDH:5’荧光基团-TGATGCATCTATGAACGCTTC-3’淬灭基团。-2所述的引物对及相应荧光探针,其特征在于所述荧光探针5’端的荧光基团为FAM、TET、VIC、HEX或ROX,3’端的淬灭基团为BHQ-1、BHQ-2、Dabcyl、Eclipse、或TAMRA。-B*27等位基因的试剂盒,其特征在于所述试剂盒包括权利要求1所述的检测引物及其相应探针和/或括权利要求2所述的检测引物及其相应探针。-B*27等位基因的试剂盒,其特征在于所述试剂盒还包括如权利要求2所述内控引物对及相应荧光探针。-B*27等位基因的检测方法,所述方法包括使用权利要求1和/或权利要求2所述的引物及探针。-B*27等位基因的检测方法,所述方法包括使用权利要求4-5所述的试剂盒。-2所述的引物及探针在检测人HLA-B*27等位基因中的应用。104450913A用于检测人HLA-B*27基因的引物、探针、荧光PCR试剂盒和方法技术领域[0001]本发明属于生物医学临床分子检测领域,具体涉及用于HLA等位基因型HLA-B*27等位基因检测的引物、探针、荧光PCR试剂盒和检测方法。背景技术[0002]HLA抗原是人类主要组织相容性复合体(plex,MHC的表达产物,在免疫系统中主要负责细胞之间的相互识别和诱导免疫反应,调节免疫应答的功能。HLA抗原可分为三类:Ⅰ类分子为HLA-A、-B、-C系列抗原,广泛分布于各组织有核细胞表面,包括血小板和网织红细胞,成熟的红细胞一般不含HLA抗原;Ⅱ类分子为HLA-D/DR、-DP、DQ系列抗原,主要在B细胞和抗原提呈细胞上表达,这两类抗原都与移植有关,其中Ⅱ类抗原更为重要;Ⅲ类分子为补体成分。编码人类HLA的基因位于第6号染色体上,是迄今已知基因中等位基因多态性最高的基因复合体,全世界已发现超过2700多种等位基因,虽然其中多数等位基因非常罕见。HLA基因是人类最复杂的遗传多态性系统,其多态性分布存在明显的族群特征。[0003]HLA-B*27属于HLA-B类,呈现显性遗传。研究发现HLA-B*27阳性者患强直性脊柱炎的概率是阴性患者的200倍~300倍,超过90%的强直性脊柱炎患者携带HLA-B*27抗原。强直