文档介绍：《农产品/食品快速检测技术》课程-微教材微课编号W1201微课名称速测卡法检测莱克多巴胺的原理及速测卡使用方法所属模块(章节)残留物的快速检测子模块兴奋剂类药物残留的快速检测关键词速测卡;莱克多巴胺;原理;方法是否通用√通用农产品食品是否重点建设√是否微课类型讲授型微课形式PPT动画式教学设计模式直观演示法教学目标了解胶体金法检测莱克多巴胺的原理;掌握胶体金速测卡检测莱克多巴胺试剂盒的使用方法。教学内容知识点技能点胶体金速测卡的基本构造;胶体金法检测莱克多巴胺的原理;胶体金速测卡测定莱克多巴胺的方法;使用胶体金速测卡的注意事项。胶体金速测卡测定莱克多巴胺的操作步骤知识讲解1、免疫胶体金技术: 免疫胶体金技术(Immunecolloidalgoldtechnique)是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术,英文缩写为:GICT。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。2、使用优点(1)使用方便快速,便于基层使用和现场使用,所有反应能在15分钟内完成;(2)成本低,不需要特殊的仪器设备;(3)应用范围广,可适应多种检测条件;(4)可以进行多项检测,若阳性样本比较难获得,多项检测可以节省样品,降低成本;(5)标记物稳定,标记样品在4℃贮存两年年以上,无信号衰减现象;(6)胶体金本身为红色,不需要加入发色试剂,省却了酶标的致癌性底物及终止液的步骤,对人体无毒害。3、测试原理层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式,相比ELISA试剂,除标记物不同外,同样服从于抗原抗体反应的特性。此种检测方法具有明显的优点:*方便使用,体现在操作简单,不需经过特殊培训。*短时间获得检测结果,一般10-15分钟即可得出结论。*不同环境下的稳定性好,不需冷藏。*相比而言,其生产成本和检测成本均较低。*检测标本种类多:可用于查血、尿液或粪便,因而适合各种检查边学边练/案例分析任务1:速测卡法检测莱克多巴胺的原理莱克多巴胺快速检测试纸基于胶体金免疫层析技术。检测时,样品中的莱克多巴胺在流动过程中与胶体金标记的特异性抗体结合,抑制了抗体与固相载体膜上的莱克多巴胺-BSA偶联物的结合,如果样品中的莱克多巴胺含量大于检测灵敏度,T线在规定时间内不显颜色,结果为阳性,反之,T线显红色色带,结果为阴性。无论检测液中莱克多巴胺浓度高低,C线均显红色色带。图1莱克多巴胺检测原理任务2:速测卡法检测莱克多巴胺的方法(动物组织)参考标准:莱克多巴胺快速检测卡使用说明书1、操作技术要点:(1)取4g去脂肪的肉泥匀浆于50ml离心管中,,盖紧管盖。(2)将装有样品的离心管置于80℃水浴锅水浴10min。水浴时间不要太长,肉质变白即可。将渗出液转移至洁净离心管中,冷却至室温(样品控制在20℃±5℃)。4000r/min离心1min。取中层液体作为待测样品液。(3)取出检测卡,开封后平放于桌面。滴加3滴上清液于样