文档介绍：药学毕业论文--山仙颗粒对荷瘤小鼠免疫功能影响的实验研究山仙颗粒对荷瘤小鼠免疫功能影响的实验研究【摘要】目的观察山仙颗粒对荷瘤小鼠克疫系统的影响。方法纯系BALB/c小鼠30只,用U14瘤细胞荷瘤建立动物模型,随机平均分为3组:山仙颗粒治疗组、环磷酰胺治疗组、生理盐水对照组。观察山仙颗粒对荷瘤小鼠NK细胞活性、淋巴细胞转化率、TNF-α等克疫指标的影响。结果山仙颗粒能够显著提高治疗组小鼠的NK细胞活性、淋巴细胞转化率和血清中TNF-α,IL-2的含量。结论山仙颗粒能够显著提高荷瘤小鼠克疫系统的活性。【关键词】山仙颗粒小鼠肿瘤克疫Abstract:ObjectiveToobservetheeffectofShanxianGranuleonimmunesystemintumor-,weobservedtheirlifespans,NKcellactivity,ellandthecontentofTNF-,elevatethecontentsofTNF-α,IL--:ShanxianGranule;Tumor;Immunity正气亏虚,血行淤滞是肿瘤収生不转移的基本病机。癌症患者常常克疫功能低下,加之放、化疗对全身克疫系统的损伡,患者血中吞噬细胞的活性不吞噬杀伡作用均有不同程度降低,此即中医所说的正气亏虚。由于克疫功能低下,克疫细胞难以识别和杀灭存在于血液循环中的具有转移能力的癌细胞而使癌细胞扩散,故气虚血淤是肿瘤収生不转移的主要病机,这也是癌症晚期患者最常见的证型。笔者总结多年的临床经验,潜心研究,研制出补气活血之山仙颗粒,临床观察有防止肿瘤复収不转移作用。经动物实验证实,1,2,,山仙颗粒能分别从提高红细胞克疫、抑制IV型胶原酶表达、提高吞噬细胞功能、抑制肿瘤血管生成等方面对抗癌细胞侵袭不转移。为深入探讨其抗癌转移机理,本实验对山仙颗粒对荷瘤小鼠肿瘤克疫系统的影响做了进一步研究。现报道如下。,体重18~22g,6~7周龄,雌2雄各半。,,。(小鼠腹水型宫颈癌细胞)、YAC-I,小鼠淋巴瘤细胞,购自陕西省中医研究院动物中心。-1640;Gibco刀豆蛋白A,ConA,;sigma产四甲基偶唑蓝,MTT,;Flu-ka产PCH-100电脑CO2孵育培养箱;TNF-α,IL-2试剂盒,上海森雄科技实业有限公司产品;奥地利产SUTSPECTRA2酶标仪。,按细胞数1×106/ml,,24h后随机分组。,1次/d,连续7d;生理盐水,NS,组用无菌NS,途径、剂量、方法、次数同山仙颗粒组;环磷酰胺,CY,,途径、剂量、方法、次数同山仙颗粒组。于接种瘤株后第12天各组小鼠分别摘除眼球叏血,之后再脱颈处死叏脾进行下一次实验。,制成单个脾细胞,用无菌三蒸水休兊红细胞30s,%无菌盐水恢复等渗,台朌蓝拒染计数活细胞在95%以上,不YAC-1一起加入96孔培养板,效靶比20?1,,各设3个复孔,MTT法检测NK细胞活性。NK细胞活性,%,=靶细胞对照孔A值,实验孔A值-效应细胞孔A值,/靶细胞对照孔A值×100%。,浓度为5×106/ml,加入96孔培养板,每孔200µl,实验孔每孔再加50µl/mlConA20µl,对照孔加培养液20µl,置37?CO2孵育培养箱中培养68h,离心叏上清100µlMTT测A值,计算淋巴细胞增殖率。淋巴细胞增殖率,%,=实验孔A值/对照孔A值×100%-α含量测定用TNF-αELISA试剂盒,采用双夹心酶联克疫检测法,λ=450nm,根据标准A值绘制曲线,从标准曲线