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探究盐水对菠萝中菠萝蛋白酶活性的影响.doc

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探究盐水对菠萝中菠萝蛋白酶活性的影响.doc

上传人:ttteee8 2019/12/20 文件大小:85 KB

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探究盐水对菠萝中菠萝蛋白酶活性的影响.doc

文档介绍

文档介绍:,抗水肿作川的疏基酶,能分解蛋门质、酯和駄***。菠萝蛋白酶一般从菠萝汁或菠萝废皮中提取,为浅黄色无定形粉末,分了量33000,微有异臭,微溶于水,不溶于乙醉、***、***仿,乙瞇,(单宁)沉淀法提取出菠萝蛋白酚,然后通过考马斯亮蓝法测定酶制品屮波萝蛋白酶的总量,最后菠萝蛋白酶将酪蛋白水解产生酪氨酸,通过在275nm波长下测定吸光度的变化,可以测得菠萝蛋白酶的活力。实验髀材与试剂1、实验材料新鲜菠萝(自备)、、实验试剂柠檬酸钠维生素单宁溶液***化钠溶液酪蛋口溶液氧氧化钠溶液磷酸缓冲液(溶解磷酸二氢钾,)激活剂(,,内含15mmol/L硫代硫酸钠和6nunol/LEDTA-2Na,现配现用)研钵;离心机;紫外可见分光光度计(lcni石英比色皿);恒温水浴锅(37°C);试管、试管架;烧杯、容量瓶;移液管;实验步骤(一)预处理菠萝编号123菠萝100g100g100glmol/LNaO100mlO-Smol/(二) ,和适量柠檬酸钠一起放入研钵研成匀浆。,离心7mino取上清液3・加Vc,%单宁溶液搅拌15min,静置40min4200r/min,5min离心。%EDTA溶液,%***化钠液。4200r/min,5min离心。%***化钠溶液,4000r/min,7min离心。得酶沉淀。(三) (y为吸光度,x为蛋白酶质量)(四) 波萝蛋门酶活力的测定1、 ()至10ml,离心得上清液;2、 取4支试管,分别标号1、2、34,;3、 另取4支试管,分别对应标号1'、2,、3,、4,,;4、 将8支试管置于37°C水浴;5、 %酪蛋白混匀6、 37°C水浴下反应10min;7、 向8支试管中各加入8m1lmol/L的氢氧化钠溶液,摇匀,于室温放置30min;8、取各自対应的试管为空白调零衣275nm波长下测定吸光度