文档介绍：UniversityCode:10225RegisterCode:harideStructureAnalysisofLepistaSordidaCandidate:Supervisor:AssociateSupervisor:AcademicDegreeAppliedfor:Speciality:DateofOralExamination:、University:,2014NortheastForestryUniversity万方数据摘要摘要花脸香蘑(Lepistasordida)香味浓郁,味道鲜美,是一种具有较高食用与药用价值的珍贵食用菌,能够进行人工栽培,但由于技术不成熟,产量不高,尚未进行大规模商业化生产。多糖是食用菌中最广为人知、最有效的抗肿瘤和免疫调节活性物质,国内外学者已经对700多种担子菌的多糖进行了研究,相比之下,花脸香蘑多糖的研究才刚刚开始。本文探索了花脸香蘑高产栽培模式,筛选出高产配方,为早日实现规模化生产提供理论依据;进行多糖提取工艺研究,优化出最佳提取工艺条件,并对分离纯化后得到的子实体多糖进行初步结构分析,以期为花脸香蘑多糖资源的开发利用打下良好的基础。主要研究内容如下:1、首先对野生香蘑产量较大的齐齐哈尔市甘南县双河农场、牡丹江市镜泊湖自然风景区和牡丹江三道关自然保护区等三地的生态环境进行了调查和香蘑子实体采集,并对采集的子实体进行了菌种分离,获得3个菌株,编号分别为S1(齐齐哈尔)、J1(镜泊湖)和M1(三道关)。在对这3个菌株依据子实体形态特征进行初步分类鉴定的基础上,从基因的GeneBank中选取了15个香蘑属菌株及1个栓菌属菌株,与3个菌株的ITS序列进行比对并建立系统发育树。结果显示,包括儿和M1在内的9个紫丁香蘑菌株聚为一类,且彼此之间遗传距离较短,而包括S1在内的9个花脸香蘑菌株聚为一类,且遗传距离也很接近,由此确定,J1和M1为紫丁香蘑,S1是花脸香蘑。2、进行了花脸香蘑大棚覆土与仿野生两种出菇方式对比的栽培试验研究,结果显示,两者覆土后至现蕾时间相同,出菇时温度条件也接近:大棚内产出的花脸香蘑比较粗壮,没有香味,仿野生栽培的子实体比较单薄,与野生采集的相近,有的具备其特有的香气;仿野生栽培产量高于大棚覆土栽培,%,%。然后进行了配方对比试验研究,结果表明,随着玉米芯添加比例的增加,菌丝生长速度呈上升趋势,添加比例最大的配方六菌丝生长速度最快,,而配方三(木屑48%,玉米芯32%,麦麸18%,石膏1%,石灰1%)的生物学转化率最高,%。3、以人工栽培的花脸香蘑分离获得的菌株为研究对象,对菌丝体进行碳源和氮源利用能力试验,通过比较菌丝体麦角固醇含量可以发现,果糖、甘露糖、纤维二糖、蔗糖、葡萄糖和麦芽糖都可以作为花脸香蘑菌丝体生长的碳源,但相比之下,果糖、甘露糖和纤维二糖是更为理想的碳源;比较多糖产量结果发现,选择果糖作为碳源,多糖产量最高;丙氨酸、甘氨酸、黄豆粉和蛋白胨都可以作为氮源使用,添加丙氨酸的培养基中,菌丝生长效果最好;而含有黄豆粉的培养基中,则是多糖产量最高;尿素则不能被花脸香蘑菌丝所利用。4、以齐齐哈尔双河农场采集的野生花脸香蘑子实体为材料,进行了热水浸提法提取多糖试验,通过单因素试验研究了浸提时间、浸提温度、料水比、提取次数对多糖得万方数据摘要率的影响,并在单因素试验的基础上,进行正交试验获得最佳提取工艺。结果显示,影响花脸香蘑多糖提取率各因素大d,JIl页,序为,提取温度>料水比>提取时间,提取温度影响最大,其次是料水比,且差异性显著(P<)。同时优化出热水提取花脸香蘑子实体多糖最佳工艺条件为:浸提温度650C、浸提时间5h、料水比1:40(g/mL),%,%,证明优化实验获得的工艺条件重现性好,稳定可行。5、以驯化栽培的花脸香蘑菌丝体为原料,进行了热水浸提法提取多糖试验,通过单因素试验研究了浸提时间、浸提温度、液料比、提取次数对多糖得率的影响,并在单因素试验的基础上,进行正交试验获得最佳提取工艺。结果表明,影响花脸香蘑多糖提取率各因素大小顺序为,提取温度>提取时间>液料比,提取温度对多糖提取率影响最大,且差异显著,提取时间影响在其次。同时优化出热水提取花脸香蘑菌丝体多糖最佳工艺条件为:浸提温度95。C、浸提时间3h、料液比1:40(g/mL),在该条件下提取多糖,%,%,证明优化实验获得的工艺条件重现性好,稳定可行。6、采用热水浸提、乙醇浓度分别为30%、60%和80%情况下分步进行醇沉的方法提取野生花脸香