文档介绍：:..蛋白质盐析实验条件的探究黄秋静广西师范大学化学与药学学院桂林摘要对影响蛋白质盐析的实验条件进行了探究。认为其中三个主耍影响因素为:鸡蛋清溶液的浓度、盐溶液种类、酸的加入顺序,最终总结得出蛋白质盐析实验的适宜条件。关键字蛋口质盐析实验条件InquiryexperimentconditionsofproteinsaltingoutHuang-QiujingSchoolofchemistryandpharmacy,,ChinaAbstract::theeggwhitesolutionconcontration,saltsolutiontype,acidadditionorder,:proteinsaltingoutexperimentcondition1引言在蛋白质溶液中加入一定浓度的强电解质盐,如(NHJ2S04等,蛋白质从溶液屮析出,这种作用称为盐析蛋白质盐析是高屮阶段的重要演示实验,但实际操作中常常不能出现沉淀。盐析作用的实质是高浓度的强电解质破坏蛋口质分子表而的水化膜,同时电解质离子屮和了蛋白质所带的电荷,蛋白质的稳定因素被消除,使蛋白质分了相互碰撞而凝聚沉淀⑵。蛋口质的溶解性受所带电荷和溶液离子强度的影响,而蛋白质所带电荷与溶液的pH有关,溶液离子强度与强电解质的无机盐自身性质有关。因此木文通过改变影响蛋白质溶解性的三个主要因素:鸡蛋清溶液的浓度、盐溶液种类、酸的加入顺序等进行蛋口质盐析实验的探究,以期寻找盐析实验的最佳反应条件。2实验内容及结果讨论表1相同盐溶液在不同浓度的鸡蛋清溶液中的盐析不同浓度的鸡蛋清溶液体积2mL纯鸡蛋清溶液过滤后的鸡蛋清液V(纯鸡蛋清):V(蒸馆水)=1:2V(纯鸡蛋清):V(蒸镭水)=1:4V(纯鸡蛋清):V(蒸憾水)=1:6饱和硫酸鞍的滴数4滴出现沉淀,10滴明显4滴出现沉淀,10滴明显17滴出现沉淀,25滴明显20滴出现沉淀,25滴明显20滴出现沉淀(振荡后消失),30滴明显复原时加入蒸憾水体积(与饱和盐溶液和蛋淸液总体积相对比)3倍体积3倍体积3倍体积3倍体积3倍体积注:鸡蛋清液过滤时选用浸湿再拧干的纱布叠成4层放入漏斗中过滤。过滤后黏在纱布上的物质弃之不用。实验表明,纯鸡蛋清液和过滤后的鸡蛋清液盐析实验效果最好,但纯鸡蛋清液加水复原时出现分层,过滤后的鸡蛋清液盐析效果更好。鸡蛋清中的蛋白质主要有卵清蛋白,卵黏蛋白,伴清蛋片等,其中卵清蛋白,伴清蛋白溶于水、稀酸和稀碱,而卵黏蛋白彳、易溶于水。因此,需要把不易溶于水的卵黏蛋白过滤掉,加水后才不会出现分层。(NH4)2sojNH4C1Na2S04NaClMgSOi饱和盐溶液pH4-55-6777产生沉淀时滴加的滴数750505050现