文档介绍：微生物保藏及基本操作技术
中国工业微生物菌种保藏管理中心
姚粟博士
微生物菌种保藏
菌种是进行微生物学研究和应用的基本材料,是发展生物工程的重要基础条件之一,是国家的重要生物资源。
菌种保藏管理要求各保藏中心必须具有保藏菌种的详细历史及有关实验资料。并对其所负责保藏的菌种均应采取妥善、可靠的方法保藏,避免菌种的污染或死亡。
《中国微生物菌种保藏管理条例》
微生物菌种保藏
制订专门菌种保藏管理制度;
同一株菌种采用两种以上保藏方法保存;
对只能采用一种保藏方法的菌株备份存放于两个以上的保藏设备中;
对菌种的入库和出库记录入档,实行双人负责制管理;
设专人负责管理菌种保藏设施正常运行,定期检修维护。
微生物菌种保藏
微生物菌种保藏方法
基本原理是在挑选优良纯培养物并使其处于休眠状态基础上,人为地创造一个有利于休眠的环境,使其长期保存后仍能保持菌种原有的优良特性。
基本措施是低温、真空、干燥。
常用菌种保藏方法
定期移植法
液体石蜡法
真空冷冻干燥法
-80℃低温冻结法
液氮超低温冻结法
定期移植法
亦称传代培养保藏法,指将菌种接种于适宜的斜面培养基上,最适条件下培养,完成培养于4~6℃进行保存并间隔一定时间(3-6个月)进行移植培养的一种短期菌种保藏方法。
操作步骤:
斜面制备接种培养保藏
接种
定期移植法
操作简单,使用方便;
对设备和人员要求不高;
可随时使用,便于观察菌种;
工作劳动强度大,属短期保藏,保藏成本高;
菌种传代频繁,易退化、污染。
液体石蜡法
指将菌种接种在适宜的斜面培养基上,最适条件下培养好后注入灭菌的液体石蜡,使其覆盖整个斜面,再直立放置于低温(4~6℃)干燥处进行保存的一种菌种保藏方法。
操作步骤:
液体石蜡预处理
斜面培养物制备
灌注石蜡
保藏