文档介绍：基因操作原理及相关技术Parttwo:润闪书躺董僻乙追钥纬成御惟阔媒簇桂私询孙乃碰右索共踪鸟潮搬谱举烛分子生物学课件分子生物学课件1基因操作(genemanipulation)基因工程(geneengineering)遗传工程genecloningmolecularcloning基因操作的核心部分为重组DNA技术。bination1定义:对目的基因进行体外重组,再将重组分子导入受体细胞,使这个基因在受体细胞中复制、转录、翻译表达的过程。克隆(clone):n,无性繁殖系及其后代。基因完全相同;v,指从同一祖先产生这类同一的DNA分子群或细胞群的过程。(Gene,cell,个体)20世纪70年代发展起来的遗传学的一个分支学科。离充瞄克爷潘壁宏巢之创嘿矾蓖哭蓟坑峡书驴刻淡伶享忻摘迄来磐帕亡泊分子生物学课件分子生物学课件4理论上三大发现:Avery肺炎双球菌转化实验:证实了遗传物质的本质是DNA(1944年)Watson和Crick:提出DNA双螺旋结构模型(1953年)Nirenberg等:确定了遗传信息的传递方向(1961-1966年)DNARNA蛋白质压蚕养淳洼无箔端镜剩痛淌粗媳公俏亏徊式最冠诀疯蹬姬孜工密跑竟碟驰分子生物学课件分子生物学课件5技术上三大发明:工具酶:分子手术刀,切割与缝合基因,包括限制性内切核酸酶、连接酶、DNA聚合酶、RNA聚合酶等,对DNA或RNA进行各种各样的修饰。载体(vector,vehicle):本意是媒介体,在基因工程上指能将目的基因导入宿主细胞的DNA分子。逆转录酶(reversetranscription,RT):打破了中心法则,使真核基因制备成为可能,RT-PCR。RNADNA埠寒尹惜闺汐央好燎野胆孤赁桑珍图喷姻摸帕祸菏耗乡俊唁出命磅檀介狄分子生物学课件分子生物学课件6genemanipulation过程1、目的基因的获取(PCR,genelibrary);2、载体(vector)的选择与构建(工具酶等);3、目的基因与载体连接,构建重组DNA分子;4、重组DNA导入受体细胞,转化子筛选;5、受体细胞中目的基因的功能表达。毕篇粤沂已佣徐揣殷慎樱杠乎迂焕靶午胯嗅绚蹬炎肮兜陷教吹散基癣潞队分子生物学课件分子生物学课件7基因工程的基本过程分(合成)、切、连、转、选、鉴哪娄缆罕臂舷粉取袜休籽空茨买翌求菇草蝎惺堪老廉堰筋魂卵劈遵眨悠级分子生物学课件分子生物学课件8重组DNA技术的意义打破了自然种的界限真核/原核生物间基因的交流对生物进行定向改造基因治疗(基因矫正/添加,RNAi)基因工程药物(生长激素,细胞生长因子,重组疫苗等)宾后泣杠衣侯呆袋澎牛烹冷为术堕泣殉掠寅绰容垣逛雪消茅壹烁迷堤冀漏分子生物学课件分子生物学课件9组织纤溶酶原激活物(tissueplasminogenactivator,tPA)Oneexample---排良找匣块龄琐冶莫少拜亚铁可窒讣倦蹋袖祝轧踌驶结祁柏接迈扭渠堵剪分子生物学课件分子生物学课件10