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文档介绍:上海水产大学硕士学位论文分子生物学方法在鉴别鱼糜制品原料鱼种中的应用摘要随着我国水产加正业的发展,特别是鱼糜制品产爨的不断增加,水产加工原料豹菇凄控割变霉茏必重要。秀了傈护某些秘群,确绦食品生产严播遵照规藏进行,同时避免假冒现象,保护消费者权益,水产制品中鱼种的鉴别已经成为消费考帮鹱量捡测熬门共嬲关注鲍热点。撩于鱼糜制品水产加工程度较高,经各工序如高温、切割、添加调料和色素等处理后,己缀难通过形态,妹党等常规感宫鉴定方法对其鱼釉进行攒确鳟辨别,而对于食品中原料成分的鉴定,我国至今还缺乏相关的检测标准。因此,必须尽抉摸索建立一条有效、实用的鱼种鉴是技术。本文探索了利用分子生物学技术来检测礅麇制品审原料惫种,通j寤PCR(聚合酶链式反应)方法,对水产摄mt-DNA中的16SrRNA基嚣片段进行测序,对鱼种谶行鉴别。本文兜对新鲜的活鱼通过上面的方法进行了鍪定,通潍比对,发现实验所得序列与基蹦库中的序列相吻合,说明该法用于鱼_种鉴别是W行的。然后以食品学院自制的囱鲢鱼丸及超市购买回来的含有两种组分的鳕鱼丸、章爨饼和国外蟹柳作为原料,采用普通酚一***镑抽提法进行熬因组DNA提取、选用16SrRNA基因作为目的萋因,利粥16Sar(12510)K阿n炎FCAAAAAC船和16Sbr(oGl脚AACTCAG触rCACGT两条序列作为引物,对16SrRNA进行PCR扩增、克隆、测序,从而获得原料产品的t6SrRNA蒸因部分片段序梦Ij,通过运用BLAST软件,将16SrRNA部分片段序列和Genbank中更多的序列进行比较,找至《褶似经嫒高莳序捌,根据同源设理论,傲出鱼种签定。通过实验,本文确立了鱼糜制品熬因组DNA的提取方法、优化了PCR扩增反应体系、PCR扩增反应条件。对最终测序获得翡16SrRNA基函部分片段警弼,运用clustwalw软件谶行序列比对时发现:自制白鲢鱼丸的16SrRNA基因部分片段序弼与自鲢骁涛的保持一致。丽对乎超帝袋目的鱼簇翻蒹(含有猿涛稻囊縻),运用BLAST软件,将获得的序列与Oenbank中的序列进行同源性比较时,结果显示该产品中含有两释缀分,一释是名为鳜鱼戆戒分,努静一静是猪两缝分。豢鱼饼中的章鱼馅料为Octopusvariabilis,产品符合产品说明。国外鼹柳该产品含有瓣鱼戒分,与标签说鹗一羧。鸯戳上结果说明该法对予鱼壤制晶巾黪舔糕鱼耱豹签定上海水产太学硕士学位论文具有W行性。关键词:鱼种鉴别,线粒体DNA(mt--DNA),16SrRNA,PCR上海水产大学硕士学位论文IdentificationoffishspeciesinsurrimiproductsusingMolecularbiologytechniquesAbstractwiththedevelopmentoftheaquaticproductmanufacture,espe砖allyinthecontinuousincreasingoftheou印utofsnrimiproducts。,,Cutting,addingtheflavoringandpigmenLBecauseoflackofrelevanttestingstandards,(hainreaction)method,andthe16SrRNAsequencesofmt—pared