文档介绍：0B2O-2混合样品it面颈不平衡..混合比例I:1;b・混合比例10:1;:11•定性分柝二组分的混合样品在日常检脸中较为常见。在分析二组分混合物时,在一■个基因座上冇四个等位基因,按相应组合,可有3对等位基因组合:同样地,在一个基因座有三个等位基因,可有6对殂合;有2个等位基因,可有4种可餡的组合;而一个等位基因,则只有一种可能,即二个个体均为纯合子且等位基因相同(表20-4)。*20-4二组分混合簡在一亍基因座图谱答位着因可能组合筲位基为畫目及分型组合四6等位基因A、B、C、DA/B+C/D;A/C4B/D;A/D+B/C;三个等位基丙A,B、CA/A+BfC;B/B+A/C;C/C+A/B;A/B14/C;A/B+B/C;A7C+B/C;二个等位基因A,BA/B+A/B;A/A+B/B;A/B+A/AsA/B+B/Di一个等位基因AA/A+A/A2•定捷分析、荧光标记PCR产物可以准碇測定各等位基因荧光峰高、峰面积,却各等位基因片段进行定量分析。任一基因座等位基因峰面积比值与混合样品内组分比例有密切的榕关性。单一个体成分时,杂合子基因座有二个峰,即二个等位基因,峰面积基本接近;不同比例混合的混合样品会出现蜂面积的不平衡。样品等位基因峰面积比值接近样品混合比例,可以由峰面积比值推知混合比例。有实验表明;当二个样品混合比例为10:1时,较少成分样品的等位基因峰髙相当于主要等位基因的“WitieT峰的峰值;当混合比例为20:1Iht,基本上检测不到来自少量混合成分的等位基因•衷现为单一组分图谱{图20-2b,c)当确定为混合祥品时,两两比较,计算两峰峰面积比,以确定各自可能的基因型。混合样品STR图溝的结果僻释程序实际混合样甜结果分析稈序可分为如下5个步験:'单一组分在一个基因座最多拥有二条带或二个稣,二条带或峰以外的均称为额外带或峰。,或只得到部分图谱,或案件涉及的个体均为纯合子时,混合样品很可能没有徹外带。尽管一个基因座没有锻外带■但有时也可以从等位基因峰面积不对称现象推断岀为混合STR图借丫如AmelogeninXY的严重不平衡,即表承可能为混合样品。鉴定混合物中供体的数目一旦确定'为混合STR图谱,就要评估混合物中可能的供体数目。每一个基因座的等位基因数目及他们的相对比例是十分有用的参数。二个杂合子个体的最大等位基因数目为4,在一个基因座出现5或6个竽位垂因则表明有三个或三个以上供体存在。根据经验,在办案中经券遇到的是二个个体混•合的混合物•有时也会遇到三个个体混合的,应予注意。确定混合样昂中各混合组分的大约比例•对子荧光检测系统,计算各峰面积之比,确定混合组分的可能比例。,重新确定分出等位基因对。在实际应用中,冇时分析人员巳知其中一组分等位基因型堆来自被害人,那么根据已知等位基因型在混合图谱中比对时将其减去,留下的则为另一组分的等位基因型。比较混合样品可能组分组合图谱与来自比对祥品的图谱根据所推断的混合组分的等位基因型,与嫌疑人的等位基因型比对,如果在所有的基四座上都一致,那么此人就不可能被排除为混合逝痕一组分的可能供体,另一嫌擬人的等位基因型与混合样品中另一组分等位基因型(即剩下的等位基因型)匹配,则不能排除此二个嫌疑人为混合样品中DNA的供体,计算似然比率,确定现场样品是否来源于他们。似然比率(LR)的计算混合样品LR的计算有以下5个步骤:(1)明确控方和辩护方的假设,即Hp和Hd含义;在Hp下•计算Pr(物证iHp);在皿下,列出案犯可能的基因型与频率,计算Pr(物证IFM)计MLK=计算多个独立分析基因座或标记的总LR,LR=HLRi式中LW表示某一个基因座的LR,n为总基因座或标记数。根据案件性质、样品混合组分组成,二组分混合样品可分为三种悄况:(.1)来自受害人和嫌疑人的混合物;(2)来自嫌疑人和另一米知个体的混合物;(3)来自于二个嫌軀人的混合物「。(1)来自于受書人和蟻範人的混合物Hp表示混合斑为受喜人和嫌疑人所留。Hd表示混合斑为受害人和人群中随机一个体所留。山Pr(初证!Hp)bK=Pr(物证田d)那么似然比率含义是混合斑为受害人和该嫌疑人所留的假设与混合斑为受害人和人耕中随机个体所留的假设比值。P(MtV,SIHp)_P(MIV』.Hp)P〈V,SIHp)P(MlV,S,Hd)LK=P(M,V,SIHdl','Hd)XP(V,SIHd)=