文档介绍：VYSIS说明书试验程序原理21黄Y黄X绿在原位杂交X绿光探针centromerregion是一种在一个细胞标本里能看见特定的核酸序列(尤其是DNA)的技术,(FISH)。羊水标本包括间期细胞用标准的细胞遗传学方法附着在玻片上。样本标本DNA变性,然后与CEPx/yandLSI21探针杂交。在杂交后,多余的和未结合的探针被一系列洗涤所除掉。染色体和核DNA用特殊的染料被复染,,能看到强烈的橘黄光和绿色的荧光信号和蓝色的复染核。通过显微镜检查21X,andY染色体点计,荧光染色区域明亮地突出于核的DNA普通的蓝色荧光(通过DAPI复染).FISH程序能使核的21,X,andY染色体点计可见。CEPX/YDNA探针是一种绿光和橘黄光混合物,直接标记荧光的DNA探针,分别在X和Y染色体的DXZ1和DYZ3区。LSI21DNA探针是一种橘黄色光直接标记的荧光DNA探针,。本试验设计目的是用荧光原位杂交法探测和量化21,X,andY染色体。试剂和仪器提供的材料本试剂盒包括四种试剂,够约20次测试。成分组成容量储藏LSI21DNA探针:(探针经过预变性)橘黄光标记DNA探针与阻断DNA和杂交缓冲液预混合(右旋糖酐硫酸盐,甲酰胺,SSC)200ul/小瓶(10ng/ul)-20℃避光CEPX/YDNA探针(探针经过预变性)绿光荧光标记X探针和橘黄光标记Y探针,与阻断DNA和杂交缓冲液预混合(右旋糖酐硫酸盐,甲酰胺,SSC)200ul/小瓶(15ng/ul-20℃避光DAPIII复染剂125ng/MlDAPI在苯二胺二氢氯化物,,甘油和缓冲液中600ul/1小瓶-20℃避光NP-40去离子去污剂4ml/2小瓶-20到25℃20xSSC氯化钠和柠檬酸钠66g/1包装同上探针对照玻片男性,羊水细胞(正常)固定的生物标本得自正常男性羊水细胞加于玻璃显微镜玻片5片(10靶区)-20℃干燥产前筛查阳性探针对照玻片。固定的生物标本得自人成纤维细胞系加于玻璃显微镜玻片5slides(10靶区)同上储存和处理储存未开封的试剂盒做为一个整体在-20℃避光,。储存探针对照玻片在一个密封的容器中在-20℃,。这些储存条件适用于所有开封及未开封的组成部分。需要但未提供的材料实验室试剂超纯甲酰胺储存于+4℃至多一个月(从收到起,具体看制造商的建议的详细信息)浓缩盐酸(12N)HCL1N氢氧化钠纯净水(蒸馏或去离子的orMilli-Q).储存于室温中carmoy’s固定剂(3:1甲醇:醋酸)drierite干燥剂1x胰蛋白酶/EDTA(%胰蛋白酶,-4Na于Hanks平衡盐溶液中withoutCacl2,-7H2O)%氯化钾实验室器械