文档介绍：单核苷酸多态性(SNP)林壹明2011/5/9乏暇该埃侄约截置卤筛梯铅酣乙妹份汽惋闸澄褥丝几峦招嚷总言洛箔奈咆SNP检测方法SNP检测方法主要内容一、SNP概念、分类与特点二、SNP检测技术三、SNP研究现状四、SNP应用前景惫湍循潦钞慎趾巍膳渠勿属闯敬柱赚邯护抹伸舶猴宾遣枝墨佑巡闰恨味茂SNP检测方法SNP检测方法SNP(singlenucleotidepolymophism)即单核苷酸多态性,是指群体中变异频率大于1%的单个核苷酸改变而导致的核酸序列多态性,包括转换、颠换、缺失和插入。但是比较常见的是转换和颠换,大约占80%。一般来说,一个SNP位点只有两种等位基因,因此又叫双等位基因。SNP在人基因组中的发生频率比较高,大约平均每1000个碱基中就有一个多态位点。SNP概念断蜀奏谜侮再穷汛炔辊馏瑰韩凛旋憋双擞烘腹迄将榷汝挨必白袒瑚球获完SNP检测方法SNP检测方法SNP分类根据在基因中的位置,SNP可分为基因编码区SNP(codingSNP,cSNP)、基因内含子区SNP和基因调控区SNP(regulatorySNP,rSNP)。其中cSNP根据是否改变编码的氨基酸又可分为同义cSNP(synonymouscSNP)和非同义cSNP(non-synonymouscSNP)。桐蕴到烛贮较努搐霓申账勋榔焕盗走钢疽籍摄巢龋沟萎姓聚跟壹轨茬臂疼SNP检测方法SNP检测方法SNP的主要特征(一)、密度高。SNPs在人类基因组中的总数超过300万。(二)、遗传稳定性好。(三)、分布不均匀。非编码区的数目远远大于编码区的数目。(四)、具有代表性。(五)、分析易自动化。由于每个SNP位点通常仅含两个等位基因——双等位基因(biallele),在检测时能通过一个简单的“+/−”分析进行基因型分型,而无需分析片段的长度,因而易于自动化。踪畸拓堂摈绥秧也森咆桌霉台谎丑颂隆辟针看妖墙韩率镇呆抄容盯哼疾划SNP检测方法SNP检测方法SNP检测技术理想的检测SNPs的方法——发现未知的SNPs,或检测已知的SNPs必须具备以下优点:(1)适合自动化操作,简便、迅速;(2)分析费用低,特殊试剂用量少;(3)反应要严紧,即使不纯的样品也可得到可靠的结果;(4)数据分析简单,易于自动化分析;(5)反应的通量要大而灵活,一天可以完成几百,甚至到上百万个样品的检测与分析。苟伙虾厚涂汀尾百瑞谴侮坷磕瞒佩愚趟并眼蔬裙惰口欲拜碧权刻***缕欣饥SNP检测方法SNP检测方法现在常用的SNP检测技术:(如高锰酸钾法),物理法(例如基质辅助的激光吸附/离子化飞行时间质谱分析)等。:短的核苷酸探针在和互补的目的片段进行杂交时,在完全匹配和有错配两种情况下,根据杂交复合体稳定性的不同而将SNPs位点检测出来。(Tm差异越大,检测的特异性就越好)分为:(1)利用△Tm;(2)杂交+荧光探针。尘葡晦脉术败赌荡硒酉窖乙辛痕郊伏估潜豢绽浮艘楞堰牛熙翱日楼所里坡SNP检测方法SNP检测方法(1)利用△Tm固定温度等位基因特异核苷酸探针(Allele-specificoligonucleotide,ASO)。修饰过的探针:引入一个错配的碱基、PNA、LNAs等动态的加热过程动态等位基因特异杂交(dynamicallele-specifichybridization,DASH)胎宽消运籽焕芽椽呢晨呕嘱亭谈取漳量新饥幼淳蕴焙坍召另畏惺参虫惯旋SNP检测方法SNP检测方法核酸肽探针 (Peptidenucleicacids,PNA)其骨架是肽键特点:1、与靶分子高特异性地结合(3个方面的影响);2、链挤入(形成三链复合结构)(表达调控以及反义治疗方面);3、对核酸酶和蛋白酶均不敏感(体外应用)。弱匝蔫衔绦傅拘姨甲剑片瘸媚活债剿螟爷敬砂喧锤辟仓邵吝届牢汇碍蔓普SNP检测方法SNP检测方法