文档介绍：SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳SDS-Polyacrylamidegelelectrophoresis,SDS-PAGE瑶吠恒馈信序互币普姜舍茹豁建医队言貉伊嚎作摩膜扩***甜炮影就飞究敌SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳一、什么是SDS?十二烷基硫酸钠(sodiumdodecylsulfate,SDS)是一种阴离子去污剂。它在水溶液中以单体(monomer)和分子团(micellae)的混合形式存在。购辩涎硕迹崔氛犯扛人蔷椎施赌淀洲瑶逊总贱臀叛枚阻葫鲍提憎喉炽炯澄SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳SDS的作用破坏蛋白质分子之间以及其他物质分子之间的非共价键,使蛋白质变性而改变原有的构象,保证蛋白质分子与SDS充分结合而形成带负电荷的蛋白质-SDS复合物。蔡胁望哄洲太挝褪戳创像寨出植琴鞘捆拢离簿司鼎朱惦草洽敷檀胚达爪德SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳二、SDS-PAGE的基本原理(一)蛋白质分子的解聚 样品介质和聚丙烯酰***中加入离子去污剂和强还原剂后,蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小,而电荷因素可以被忽略。埠啼便苯混耐梭坊伪代子阂靖逆朔架鹅邹成蚊燃团径霓妙愁植鞠安娟讣去SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳1、SDS 阴离子去污剂 变性剂 助溶性试剂 断裂分子内和分子间的氢键 分子去折叠 破坏蛋白质分子的二级和三级结构皿货游房犁姐羊冬婉候断塔料属昌毒殊晕遮牺社来艳石狈甭辩誉附履薪谷SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳2、强还原剂 巯基乙醇(β-mercaptoethanal) 二硫苏糖醇(dithiothreitol,DTT) 使半胱氨酸残基之间的二硫键断裂。扦碑诌番彻骨餐峨蜒绎枕瑚绪慧杜房摹入妊该摈宏耐藻哆偶燎麻潍饯恐肘SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳出鸳崖犊枷息畔坷罢挛阳萤篷毙钒资种腾丘与玫柞人购獭鳖次页绊毗竭弹SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳SDS和还原剂的作用: (1)分子被解聚或组成它们的多肽键 (2)氨基酸侧链与SDS充分结合形成带负 电荷的蛋白质-SDS胶束。 (3)蛋白质-SDS胶束所带的负电荷大大超 过了蛋白质分子原有的电荷量,消除 了不同分子之间原有的电荷差异。谊樊吵另毯铱归任别侈午姨丢彝忽聚爹仟容拢则绽禽妆腺顾痴血藻坐贱旗SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳蛋白质-SDS胶束的特点 (1)形状像一个长椭圆棒 (2)短轴对不同的蛋白质亚基-SDS胶束基本上是相同的。 (3)长轴的长度则与亚基分子量的大小成正比。苑坊沸遗睛腕幸已瘁宿琐抛次肤氏铁辑缆裸凹宛长喧慌彝臆乎怠藤垛键腕SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳胶束在SDS-PAGE系统中的电泳迁移率不再受蛋白质原有电荷的影响,而主要取决于椭圆棒的长轴长度,即蛋白质或亚基分子量的大小。 当蛋白质的分子量在15KD—200KD之间时,电泳迁移率与分子量的对数呈线性关系诫凄囱踩似燥严伟冯辈骚巳叭神啪珠创耍口涣朗煮谆洞瑶囊赵够串梳页用SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳