肠肌灌流实验 豚鼠.doc

文档介绍：(1)离体肠管描记装置的准备见图7-15-1,麦氏浴槽中加固定量的台氏液,调节超级恒温器的温度,使麦氏浴槽内温度稳定在37±℃。通气管接95%O2+5%CO2混合气体管道。用螺丝夹调节气体管道的气体流量,调节至浴槽中气泡一个个逸出为止。(2)张力换能器固定于铁支柱上,换能器输出线接微机生物信号处理系统,仪器参数设置:RM6240系统:点击“实验”菜单,“自定义实验项目”菜单中的“肠肌记录”。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数:通道时间常数为直流,滤波频率10Hz,灵敏度3g,采样频率200Hz,扫描速度1s/div。(1)取豚鼠一只,用木槌击其头部致昏死,立即剖开腹腔,找到回盲部,然后,在离回盲部1cm处剪断,取出回肠约10cm左右一段,置于氧饱和的台氏液培养皿中,沿肠壁除去肠系膜,然后将回肠剪成数小段(约1~),用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净,换以新鲜台氏液备用。注意操作时勿牵拉肠段以免影响收缩功能。(2)取一小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对角壁处,分别用缝针穿线,并打结。注意保持肠管通畅,勿使其封闭。肠管一端连线系于浴槽固定钩上,然后放入37℃麦氏浴槽中。再将肠管的另一端系结在张力换能器的悬臂梁上,调节肌张力至2~3g(图7-15-1)。【观察项目】~30分钟后,记录一段正常收缩曲线后,依次向麦氏浴槽中滴加下列药物。加入一种药液后,观察2~3分钟,并连续记录肠管收缩曲线,然后用台氏液连续冲洗二次,待基线恢复到用药前的水平,随后记录一段基线。再加入第二种药液。浴槽液体的容量应相等。-2g/,观察并记录其收缩曲线,2~3分钟后换液。,待收缩达最高点时,加入1g/,观察并记录其收缩曲线。不换液,待曲线降至基线或基本稳定后,再加入相同浓度的ACh,观察并记录其收缩曲线。-2g/,待作用明显时(1~2分钟),迅速换液。使肠肌张力恢复正常。-3g/(不换液),加入同量histamine,观察并记录其收缩曲线。,观察其反应,当作用达最高点,肠段持续于痉挛收缩状态时,加入1g/(或更大剂量),观察并记录其收缩曲线收缩曲线基线离体回肠10-2g//-3g/Lchlorpheniramine5min后加入同量histamine10g/LBaCl2溶液1ml,作用达最高点,1g/(或更大剂量),M3受体,H1、H2、H3受体小肠:虽然M3是调节环肌收缩的主要受体,M3和M2两者都参与纵肌的收缩,除m2和m3外,m1和m4也可在鼠和兔回肠中检测到。大肠:Maed