文档介绍：CTAB法提取植物基因组DNA原理这种方法是由Murray和Thompson(1980)修改而成的简便方法。CTAB是一种去污剂,可溶解细胞膜,它能与核酸形成复合物,在高盐溶液中(()是可溶的,当降低溶液盐浓度到一定程度()时,从溶液中沉淀,通过离心就可将CTAB-核酸的复合物与蛋白、多糖类物质分开。最后通过乙醇或异丙醇沉淀DNA,而CTAB溶于乙醇或异丙醇而除去。(1)2×CTAB溶液CTAB(W/V)2%Tris-HCl100mmol/L()EDTA20mmol/L()%灭菌备用。没灭菌前呈粘稠状,CTAB灭菌后变成清亮的溶液。(2)***仿/异戊醇(24:1)(3)RNaseA10mg/ml(不用)(4)乙醇或异丙醇(5)β-巯基乙醇(6)70%,加入500μl的2×CTAB,65℃预热,用前加入20μlβ-巯基乙醇。-2g,用蒸馏水冲洗干净,再用灭菌ddH2O冲洗2次,放入经液氮预冷的研钵中,加入液氮研磨至粉末状,用干净的灭菌不锈钢勺转移粉末到预热的离心管中,总体积达到1mL混匀后置65℃水浴中保温45-60min,并不时轻轻转动试管。注:冻存材料直接研磨,绝对不能化冻。而且粉末应在化冻前转移,否则内源性DNase有可能降解基因组DNA。***仿/异戊醇,轻轻地颠倒混匀,室温下10000rpm离心10min,移上清至另一新管中。%,会出现絮状沉淀,-20℃放置30min或-80℃放置10min,12000rpm离心10-15min回收DNA沉淀。%乙醇清洗沉淀两次,%琼脂糖凝胶电泳检测基因组DNA的完整性。电泳分析基因组DNA的完整性烟草基因组DNA电泳图谱M:lDNA/HindⅢMarker1,2:基因组DNA完整性好的基因组DNA应是一条比23Kb滞后的电泳带,若降解则成为弥散状。电泳前缘为未除干净的RNA。