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中草药DNA提取试剂盒.doc

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中草药DNA提取试剂盒.doc

上传人:q1188830 2020/1/13 文件大小:30 KB

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中草药DNA提取试剂盒.doc

文档介绍

文档介绍:中草药DNA提取试剂盒HerbalDNAout货号:M090116产品及特点基于PCR的中药分子鉴定方法是辨别中药真伪,保证药材质量,促进中药产业现代化的十分重要的手段。但由于日晒,高温烘烤等处理极大地破坏了中药材DNA的完整性;处理过程中多酚多糖及其氧化物也会与DNA发生复杂的化学反应,所以从中药材中提取可以用于PCR的DNA比从新鲜植物中提取要困难很多。为解决这一问题,AndyBio在植物DNAOUT产品基础上开发了本产品。其特点如下:适合于大多数药材。得到的DNA纯净,OD260/,原液或100倍之内的稀释液一般都能直接作为PCR模板。操作简单,整个过程只需要三十分钟左右。试剂无毒无害,环保卫生。规格及成分成份100次包装(M090116)溶液A15mL溶液B15mL使用手册1份运输及保存常温运输,4℃保存,有效期一年。使用方法65℃预热溶液A,待其沉淀溶化后,充分混匀,-15mL的塑料离心管中并放置于65℃待用。称取20mg左右的中草药,先剪成或研磨成微小的碎片,然后转移到预热的溶液A中匀浆,匀浆过程中将产生大量泡沫,属于正常现象。也可以液氮研磨后将中草药粉末加入到预热的溶液A中(建议不要在陶器或玻璃研钵中研磨,因为其主要成分二氧化硅会非特异地吸附DNA,降低DNA回收量。但可以在塑料研钵中研磨)。将匀浆液置于65℃水浴保温5分钟,(此时匀浆液较为粘稠,可将枪头剪去一截后转移上清,植物碎片可倒入)。12000-15000g室温离心3分钟,(上清液的体积一般为200-700µL,如果体积超过700µL,多余部分可以不要)。有的上清液中会有少量细小块状物,但对后续操作没有影响,不必进行特殊处理。在上清液中加入等体积的溶液B,上下颠倒30秒充分混匀(溶液将呈白色混浊状),然后置冰浴中5分钟。12000-15000g室温离心3分钟,转移上清到新离心管中。***仿(自备),震荡器上充分振荡30秒混匀。12000-15000g室温离心3分钟,两相交界面将有白色膜状物。小心转移上清到新离心管中。重复***仿抽提步骤一次,此步可以有效去除含色素物质。-1倍体积的异丙醇(自备),上下颠倒30秒混匀。12000-15000g离心5分钟,弃上清,管底将有微小DNA沉淀。沉淀用75%乙醇清洗2次后,室温晾干。加入