质粒抽提.ppt

文档介绍：质粒DNA 制备plasmid extraction质粒简介质粒(plasmid)是细菌内独立于染色体并能自我复制的小环状DNA分子?其大小范围从lkb至200kb以上不等。。Chromosome DNA genomePlasmid DNA质粒是携带外源基因进入细菌中扩增或表达的重要媒介物,这种基因运载工具在基因工程中具有极广泛的应用价值,而质粒的分离与提取则是最常用、. 分子相对小2. 含有高效的自主复制成分3. 不相容性(patibility)4. 转移性5. 选择的标记(selective markers)6. 限制性内切酶单一切口质粒的结构特点?分子量相对较小?共价闭合分子?双链环状结构具有更强的抗切割和抗变性能力超螺旋DNA分子?线性DNA分子?半开环DNA分子Plasmid vectors表达载体载体含有tac启动子、Lac操纵基因、SD序列、Lac I阻遏蛋白基因等Exprssion vector细菌收集纯化质粒DNA细菌培养细菌裂解质粒DNA的提取和纯化质粒DNA的提取和纯化一、细菌的培养(bacterial culture)l先分离单个菌落,接种到含少量适当抗生素的培养基中扩增,随着细菌的生长,质粒DNA也在自主复制。