文档介绍：DNA重组技术
定义
DNA重组技术是指将一个生物体内分离得到或人工合成的目的基因导入另一生物体中,使后者获得新的遗传性状或表达所需要的产物的技术。
限制性内切酶--基因的剪刀
分布:主要在微生物中。
作用:一种限制酶只能识别一种特定核苷酸序列;并在特定的切点上切割DNA。
资料
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限制酶
连接酶
运载体
导入
步骤
练习
试
质粒
资料
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限制酶
连接酶
运载体
导入
步骤
练习
EcoRI
质粒
重播
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限制酶
连接酶
运载体
导入
步骤
练习
EcoRI
质粒
DNA被限制酶切断后有两个反向互补的“黏性末端”。被同一种限制切断的几个DNA具有相同的黏性末端,能够通过互补进行配对。
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限制酶
连接酶
运载体
导入
步骤
练习
质粒
运载体--基因运输工具
主要作用:将外源基因送入受体细胞
原理:借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。
种类
质粒、噬菌体、动植物病毒等
资料
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限制酶
连接酶
运载体
条件
步骤
练习
质粒
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限制酶
连接酶
运载体
导入
步骤
练习
质粒
存在于许多细菌及酵母菌等生物中
染色体外的小型环状DNA
可转移到新的宿主细胞中
能自主复制
质粒
基因工程
尝试标出下列序列受EcoRI限制酶作用的切点
CTTCATG TAA
GAAGTACTTAA GGGATT
小试身手:
GGCATCTTAA
GTAG
GGCATCTTAA
GTAG
TAA
GAAGTACTTAAGGGATT
甲DNA片段
乙DNA片段
G AATTCGGATT
CTTAA GCCTAA
GGCATCTTAA
GTAG
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限制酶
连接酶
运载体
导入
步骤
练习
质粒
CTTCATG TAA
GAAGTACTTAA GGGATT
GGCATCTTAA
GTAG
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限制酶
连接酶
运载体
导入
步骤
练习
基因的针线--DNA连接酶
连接部位:骨架上的缺口(梯子的扶手),不是氢键(梯子的踏板)。
结果:互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。
质粒