文档介绍：兰州理工大学生命科学实验中心生化技术理论与实践实验张伟杰王永刚1、什么是生物制药?生物制药与化学合成制药的区别?实验一抗生素效价的测定2、抗生素的种类及成分?自1940年青霉素应用于临床以来,抗生素的种类已达几千种,在临床上常用的亦有几百种,主要是从微生物的培养液中提取的或者用合成、半合成方法制造。β-内酰胺类,四环素类,抗真菌抗生素,抗肿瘤抗生素等。 3、为什么要进行抗生素效价的测定?通过测定抗生素效价来判定其质量好坏和有效成分含量的杀菌剂生物测定。一、实验目的1、了解管碟法的原理。2、掌握二剂量法测定抗生素效价单位的技术和计算方法。福斯特(,1942)和施密特(,1944)等曾用比浊法和稀释法测定青霉素的效价。效价是衡量抗菌素抗菌效能的标准,其单位可分为两大类:①稀释单位。将1毫克抗菌素配制成溶液,在一定条件下进行稀释,能抑制某一病菌生长的最高稀释度作为1毫克抗菌素中所具有的单位。②重量单位。将纯净的抗菌素重量直接作为抗菌效能的标准,即1微克相当于1个单位。二、实验原理1944年国际联盟卫生组织决定,,即1毫克氨苄青霉素钠盐相当于1667个国际单位。抗生素效价:抗生素是一种生理活性物质,它对生命现象很敏感,可以用抗生素的生物效能表示它的效价,其最小效价单元就叫做“单位”(U)。经由国际协商规定出来的标准单位,称为“国际单位”(IU)二剂量-管碟扩散法(,1945)当抗生素在菌层培养基中扩散时,会形成抗生素浓度由高到低的自然梯度,即扩散中心浓度高而边缘浓度低。因此,当抗生素浓度达到或高于MIC(最低抑制浓度)时,试验菌就被抑制而不能繁殖,从而呈现透明的抑菌圈。根据扩散定律的推导,抗生素总量的对数值与抑菌圈直径的平方成线性关系。取含菌层的双层平板培养基,每个平板表面放置4个小钢管,管内分别放入检品高、低剂量和标准品高、低剂量溶液。先测量出四点的抑菌圈直径,按下列公式计算出检品的效价。三、实验方法1、材料(1)细菌:金黄色葡萄球菌。(2)培养基:效价检定用培养基(上层、底层)。(3)抗生素:抗生素检品及标准品(高剂量、低剂量,高剂量与低剂量之比为2:1)。(4)试剂与器材:灭菌生理盐水,无菌平皿,牛津杯,无菌吸管,镊子,滴管,直尺。标准品:链霉素 高剂量:500μg/ml(1000U/ml); 低剂量:125μg/ml(125U/ml) 待测样:羧苄青霉素 高剂量:500μg/ml(?) 低剂量:125μg/ml(?)