文档介绍:郑州大学
博士学位论文
Dystrophin plex在神经元性胆碱能突触中的
表达和功能的研究
姓名:王冬青
申请学位级别:博士
专业:消化内科学
指导教师:段芳龄;冯
在神经元性胆碱能突触中的表达和功能的研究摘要郑州大学消化疾病研究所博士研究生王冬青导师段芳龄冯縘在神经元性胆碱能突触中的表达和功堂里堕突触是神经细胞相互联系、流通信息的重要场所,在神经元之间的化学信号传递过程中,为了最大限度提高信号传导的敏感性,神经元受体以及其它参与信号传导的蛋白精确的集中在神经递质释放的周围。同时在突触发生过程中,突触处所形成的特殊蛋白膜,如突触后膜的从基因中分离克隆鉴定出来。此后生化和分子生物学研究显示:是一个肌源┠さ鞍譈—为核心,膜外通过猟胂赴饣实白的┒讼嗔琩痷蔷薮蟮南赴羌艿鞍祝銷端和微丝產相结合。穿膜部分和春衔锝岷希枪餐槌梢桓龈丛拥穿膜蛋白复合物。人们通常把此复合物分三组亚蛋白复合物:蒬—、槌傻膁春衔耙桓鰏组成的春衔。近年来研究表明,谖窒赴峁埂⑾赴藕糯ǖ挤矫嬗兄匾W饔谩约坝胫喙氐南赴膜蛋白具有组成突触结构、稳定信号传导、维持突触结构稳定的重要作用。词钦庋桓龅鞍赘春衔铮渲衐且桓龃蟮陌架蛋白,最初因为膜相关蛋自复合物中的一个重要组成分子。如嗔つ谕ü齦互结合,┒顺薆褂攵喔銎渌鞍兹鐂琩。喔霾煌由或与、组成的胞浆复合物虰膊擞雂蛲吹鞍譽郑州大学觳┦可畚膌坤
谏穹煨偷┘钣闹谢刃偷姹ざ樾投槎育、认知障碍。如基因或称蛉笔Щ蛲槐涫且鸲糯浴⒔行性、肌营养不良鞍赘春衔镉辛礁鎏氐悖皇荄复合物中多个蛋白可由不同基因编码或们认为它们很有可能在脊椎动物进化早期来源于同~个基因。和和其各种剪切形式以及密切相关的蛋白。是辛硪桓白的存在有可能为其不同功能奠定物质基础。的同源蛋白高度集中表达参与组成∧ぶ衐亲槌蒁的重要分子。,Ⅱ一诩∠赴高度表达。许多实验证据已经显示这种专一性贜的发育、维持结构功能完整性起重要作用。最近几年的研究还表明甦在耐淮ズ竽さ鹘趎的聚集和稳定,荄复合物中另一个关键成分,最初是从的┒私岷希隓的其它蛋白共同组成春衔铩T谕甦Ⅱ一在肌肉和胁唤龅H谓峁剐越巧ǘ矣行藕糯ǖ嫉淖饔肹。进一步,叶和结合,又和其它信号传导分子结合,如在中枢和外周神经系统的突触中存在春衔铮缪堇嗨圃贜中的作用。目前尚无明显直接证据说明谏窬P酝淮ブ械淖饔谩5谝徊轿颐抢媒此复合物中蛋白的基因缺失或突变璴起多种遗传性疾病,造成肌营养不良及大脑发的直接原因。一个基因产生多个蛋白剪接形式。例如:的同源蛋白,它的整个蛋白初级结构特别是其┒擞隒末端和极为相似,它们由不同基因编码,人关系密切,它们都可和渌鞍鬃槌筛春衔铩易寤拱╠蛋白,可由三种弧、一基因编码,三者蛋白结构相似。多种鞍赘春衔锏牧硪桓鎏氐闶牵珼蛋白多存在一个基因产生多个蛋白不同剪接形式并在不同组织中表达,有些具有突触特异性表达。例如:在琩电器官和共同纯化出来的蛋白中鉴定出来,,尽管峁雇暾ɡ鲜笙允炯∮Q涣己蚇不稳定,说明,从而增强疽籨男藕糯ǖ寄芰Α近年来人们发现行矶嗟鞍滓脖泶镌谥惺嗪屯庵苌窬低车纳窬V小F中包括、、、和。因此我们推测感神经节和桓猩窬趕郑州大学觳┦可畚腄
作为系统研究对象,了解谏窬P缘ḿ钅芡淮ブ械淖饔谩2捎谜庖幌低车脑因:⒄庑┥窬谕淮ト菀捉惺质鹾吞迥谝糯а芯俊、大多数神经节突触是胆碱能型。⒄庑┥窬谕淮ズ臀颐且延邢喙匮芯康腘有多方面的相似性:前神经元和骨骼肌运动神经元的起源相同,分子组成相关。所以难芯拷峁助于我们运用到神经节突触的研究中。另一方面,与煌氖牵窬谕淮ナ典型的神经元性突触,因此它们又有中枢神经系统突触的特征,这样,我们可以将难芯砍晒擞玫缴窬P酝淮サ难芯恐校镏颐侵な刀灾V跎俚闹惺嗌触中,证明了与蠨相似但又不同的春衔镌谏窬P缘ḿ钅芡淮ブ的表达。推测它们有可能对神经元性胆碱能突触的发育和结构功能具有重要作用。第二步根据我们所了解的神经元性胆碱能突触中春衔锾氐悖A俗胖亓私光染色的方法迸一步研究了Ⅱ的表达情况,并构建了用瓺探针进行文库筛选。神经元性胆碱能突触中表达,并进一步发现一个新的甦剪接蛋白,最调性变化。这一结果有力地说明Ⅱ.在调节和稳定神经元性胆碱能突触结论:似的复合物在神经元性胆碱能突触的中表达。ⅱ蛞籨是谏窬缘ḿ钅芡淮中的组成蛋白且甦卸霾煌募艚颖泶镄问健的神经递质都是乙酰胆碱。叩牡ḿ钅苁芴逵懈叨韧葱浴自主神经节节经系统突触提出的假设。为了了解谏窬P缘ḿ钅芡淮ブ械淖饔茫颐鞘紫仍擞肳法检查了懈髦肿槌傻鞍自诮桓猩窬赟和副交感神经节械谋泶铩结果我们发现,,猟虳籹谏窬P缘ḿ钅突触的斜泶铮ü饷庖呷旧允菊庑〥蛋白集中表达在神经元性胆碱能突鞍字孝蛞籨谏窬P缘ḿ钅芡淮ブ械谋泶锖凸δ埽颐怯妹庖哂我们发现甦而不是Ⅱ..后我们在甦蚯贸隼鲜蟮纳窬薜ḿ钅芡淮中