文档介绍：石蜡切片与冰冻切片培训教程石蜡切片和冰冻切片优缺点比较项目石蜡切片冰冻切片目的及抗原稳定性定位准确定位不准,抗原易弥散,定性快抗原保真酶活性需修复活性好,易出阳性结果操作步骤繁琐,耗时长简易快捷保存室温,可长期保存-80°C半年左右切片厚度2-5um,易得连续切片5-10um,不易得连续切片制片效果片子漂亮,组织形态结构保存好,石蜡自发荧光有干扰抗原易阳性,冰晶易导致组织结构破坏适用一抗指定感染性标本,骨,钙化组织,脂肪,小组织临床快速诊断,原位杂交,免疫荧光,某些酶的显示如ATP酶,琥珀酸脱氢酶等冰冻切片概述:冰冻切片是将活组织迅速冰冻、切片、染色,进行病理诊断的方法。主要应用:(1)快速病理诊断(2)显示组织中的脂质(3)在组织化学上显示酶活性(4)神经组织学的镀银和镀金染色法(5)免疫荧光的研究准备材料:(1)切片机刀片(2)冰冻包埋剂(3)液氮罐(4)液氮专用冻存管(5)组织镊(6)手术刀或组织剪(7)培养皿(8)生理盐水(9)粘附载玻片冰冻切片机仪器说明1UVC功能键说明灯光开关按钮,用于冷冻箱照明。手动除霜按钮,用于激活和终止手动除霜。锁定按钮,锁定解锁定控制面板以避免无意修改输入的参数。要锁定或解锁定,按下约5秒。功能键用箭头所指的+和-键在钟型标记的面板上可以设置实际时间。按下或按钮超过1秒,时间值连续增加或减少(自动重复功能)。说明紫外灯开关按钮,用于冷冻箱消毒,开启后30分钟后自动熄灭2用箭头所指的+和-键设置自动除霜循环的起始。同时,时和分标记之间的LED闪烁。自动除霜循环每24小时进行一次。用+和-键设置冷冻箱的温度。实际温度是标准读数。要显示需要的数值,触摸+和-键。用+和-键置需要的数值。按下或按钮超过1秒,冷冻盒温度值连续增加或减少。完成设置后5秒将显示实际值。用于激活Peltier元件冷冻快速冷冻站。一旦激活,制冷系统的压缩机将在40秒后启动以加强热传导效应。仪器无Peltier元件显示为“LL”,有Peltier元件显示为“PE”。功能键说明3粗调后退按钮,用于标本远离刀片的快速移动。微调后退按钮,用于标本远离刀片的慢速移动。粗调前进按钮,用于标本靠近刀片的快速移动。微调前进按钮,用于标本靠近刀片的快速移动。(注意:以上粗调和微调按钮均可采用点按步进移动或长按连续移动。)冰冻切片操作流程取材:手术过程中取下的新鲜组织,不能太大太厚,厚者冰冻费时,大者难以切完整,大小约为24×24×2mm;设定冷冻温度:应视不同的组织选择不同的冷冻箱冷温度,冷冻不足无法切片,冷冻过度切片易碎,如:a软骨、睾丸、脾脏等高密度组织,冷冻箱温度在-10~15℃;b甲状腺、脑、心脏、肌肉等组织,温度在-15~25℃;c肝、乳腺、膀胱等含脂肪的组织,温度在-25℃以下。包埋冷冻:取出组织标本盘,放平摆好组织,周边滴上包埋剂(一般为OCT),速放于冷冻台上,冰冻。小组织应先取一标本盘,滴上包埋剂让其先冷冻,再放上组织,滴上包埋剂冷冻。修平组织:将冷冻好的组织块,夹紧于切片机标本头上,启动粗进退键,转动旋钮,将组织修平。调节防卷板与切片:制作冰冻切片,关键在于防卷板的调节上,这就要求4常见问题原因解决方法操作者要细心,准确地将其调较好,调校至适当的位置。调好切片厚度,切片时,切出的切片能在第一时间顺利地通过刀与防卷板间的通道,平整地躺在持刀器的铁板上。这时便可掀起防卷板,取一粘附载玻片,将其附贴上即可。冰冻切片冷冻温度选择表组织10-1515-2525-50肾上腺骨髓脑膀胱乳腺-脂肪乳腺-较少脂肪软骨宫颈脂肪心脏和血管小肠肾脏喉唇肝脏肺淋巴肌肉鼻胰腺前列腺卵巢直肠皮肤带有脂肪皮肤不带有脂肪脾脏或血性组织睾丸甲状腺舌刮宫物冰冻切片常见问题、原因、解决方法5