文档介绍：上海第二医科大学
博士学位论文
MLL-EEN融合蛋白致白血病的机制研究
姓名:刘晗
申请学位级别:博士
专业:遗传学
指导教师:陈竺
一——中,位于腅基因与位于霓稳蛐纬蒑融合狤融合蛋白致白血病的机制研究中文摘要圭查笪三垦壁查兰垫主堂垡笙茎基因。涉及虻染色体易位在急性白血病中较为常见,约占血病中则尤为常见,分别占%和%。鉴于涉及蛞孜坏募毙园蚴巧虾QR貉а芯克胂愀鄞笱Р±硐岛献鳎谝焕瑃籶孜坏募毙缘ズ讼赴籽2〔∪酥惺状慰寺〉摹T诟靡孜全部急性淋巴细胞性白血病ィ既ú考毙运栊园籽2的ァ8靡孜辉谟ざ毙园籽2『屯仄艘旃姑敢种萍林瘟葡喙氐募谭⑿园血病有着与寻常急性髓性白血病和急性淋巴细胞性白血病不同的特性,其白血病细胞常呈系列混杂性,因此这一类白血病被称为混合细胞系白血病9赜贛融合蛋白的致白血病机理已进行了相当多的研究,但本质问题仍未能了解清楚。但有若干报道指出合伙伴基因的存在对诤系鞍椎闹掳籽2∧芰Σ豢苫蛉保笔Я巳合伙伴的截短型鞍自蛎挥凶;芰Α1究翁獾闹饕D康木褪茄芯融合蛋白的致白血病机理,重点是研究瓻融合蛋白中的糠炙鸬淖饔谩我们首先用细胞软琼脂克隆形成试验证明了全长的融合蛋白有转化细胞的能力,而缺失了糠值慕囟绦蚆蛋白则没有转化能力。我们进一步用白血病细胞株来研究诤系鞍椎闹掳籽2∽饔谩J笛榻峁砻鳎虢囟绦蚆鞍相比,诤系鞍资笻赴硐殖鱿赴鲋衬芰忧浚只阻以及对凋亡的抗性增强。而截短型的蛋白则没有这些特性。因狤与之间唯一的差别就在于有无糠郑虼苏庑┫赴表型的差异同时也说明了糠侄訫融合蛋白致自血病能力至关重通过亚细胞定位的观察,。
活性,上调谋泶铮佣せ預。瓻对删舳拥幕性;其次,研究对陌谢蛏启动子活性的影响;最后,通过圭堂笙三堕登查堂塑主堂垡垒壅的是灿凶;。通过酵母双杂交筛选人骨髓文库,我们得到了若干个可能与嗷プ饔玫暮蜓〉鞍住F渲械腃厄蛴朐煅O的正常功能而发挥作用。为此,我们也初步研究了墓δ堋A钊司F子的活性及提高细胞的增殖能力相一致。恼庑┨匦员砻魉谙和嗤牡骺亍5獷的正常功能的扰乱是否以及如何影响自血病发定位于细胞核。由于亲B家蜃樱移銬结合结构域与细胞核定位录因子起作用。为了验证这种可能性,我们采用酵母单杂交和真核细胞单杂交等方法来检测鹘峁褂虻淖B技せ钅芰Α=峁砻鱁的确含有转录激活结构域。瓻作为一个异常的转录因子发挥作用的机制从以下几方面进行研究:首先,检测与肿瘤发生相关的若干个重要的转录因子的活芯片筛查瓻的靶基因。结果表明,瓻能通过增强然虻谋泶铩转录激活结构域就其本质来说也是蛋白质相互作用结构域。寻找ü鼸部分募集到的新的相互作用蛋白将对揭示瓻统分化过程紧密联系,并且有可能与瓻导致单核细胞自血病相关而被加以迸一步的验证。ü渲胁恳桓鯿甤峁褂蚋鶦厄合。该结构域在以前的工作中也被证明为厶寤匦琛我们在细胞共定位实验中发现,瓻能够影响恼6ㄎ唬使得芄唤胂赴恕U飧龇⑾ü跋霦胞活动中也扮演着重要角色。不仅如此,我们还发现一部分基因受瓻生还有待进一步的研究。一信号在瓻中被保留下来,因此锌赡茏魑R恢忠斐5淖性也有增强作用。另外,通过芯片发现,瓻能上调∞和关键词:、急性自血病、疎猯、转录因子
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圭查笙三堕壁查堂壁主兰焦丝奎——而来。它也被称为舭￡一,和一言前方向上被转录,该基因编码一个由个氨基酸组成的牡鞍字蔥均有发现。这些旧逡孜幌喙氐陌籽2≡枷赴砻婢<扔辛馨性又有髓性表面抗原表达,而且最近的基因表达谱分析表明这一类白血—拿剖且蛭K紫仍谝焕鼳病例中被鉴定的名称则由于人鞍子牍琓白杂懈叨鹊耐葱浴E颉瑃峁褂颉锌指被认为参与蛋白质相互作用。芄唤岷蟂—春咸逯械腎疭榉郑斡肴,U饧父鼋峁褂蛟诎籽2》⑸关综述见A硗猓サ岁以下婴儿急性白血病病例有染色体易位:在%的拓扑异构酶抑制剂引发的继发性白血病病例中有发生旧逡孜籟,U馐恰纸衔L厥獾娜旧逡孜唬色体区发生易位。还有,一般的白血病相关的染色体易位仅出现在一种细胞类型的白血病,而娜旧逡孜辉谒栊园籽2『土馨拖赴园籽2≈病与寻常的虯均有不同,因此这一类自血病又被称为混合细基因全长约为鐾庀宰幼槌蒣庑┩庀宰釉谧潘康阒炼肆个成簇的锌指结构和一个羧基端的涉及染色体带娜旧逡孜皇侨死嗉毙园籽2≈薪衔3<囊焕染色体易位,约占急性髓性白血病大多数仅涉及两个特定染色体位点的易位不同,梢院托矶嗖煌娜胞系白血病—绝大部分染色体孜凰奂暗