文档介绍：东南大学
硕士学位论文
NGF对新生脑神经元细胞缺氧缺血损伤保护作用的研究—NGF对
线粒体结构及功能的影响
姓名:黄莉
申请学位级别:硕士
专业:儿科
指导教师:蒋犁
20040508
中文摘要嵋题目:孕律陨窬O赴毖跞毖K鹕吮;ぷ饔玫难芯硕士研究生:黄莉导师:蒋犁学校:东南大学关键词:神经元细胞缺氧缺血神经生长因子凋亡诱导因子细胞色素·—列线粒体结构及功能的影响孕律陨窬O赴叭毖跞毖!眭损后的保护作用,为临床用药提供科学依据。方法:①体外培养新生脑皮层神经元细胞后,改良方法建立神经元细胞“缺氧缺血”损伤模型。②采用丁方法检测正常组、缺氧缺血组、缺氧缺血损伤后不同浓度、、、、力,找出最佳药物浓度。③应用光学显微镜、透射电镜观察不同组之间、不同时间点神经元细胞形态、超微结构改变。④利用技术与免疫细胞化学方法分别检测最佳药物浓度痬时结果:小时用药:①正常组、缺氧缺血组、药物干预组痬测值结果分别如下:测吸光度:,±,.还饩挡饬肯赴黄鸪ざ龋细胞突起长度明显低于另两组,┪锔稍ぷ槲尴灾圆钜"贛测值显示ǘ刃浓度为痬稍ぷ橄赴盍ξ廾飨愿谋洹"嵬干涞缇倒鄄煜赴不规则,染色质凝聚成块,核周间隙明显增厚,线粒体肿胀空泡化:正常组神经元细胞及缺氧缺血损伤后ぁ蝝干预组神经元细胞核大呈圆形或椭圆形,,胞浆内线粒体、粗面内质网结构清晰,核糖体丰富。毖跞毖∈焙笥靡┳槟诒冉辖峁结论:①体外培养新生脑皮层神经元细胞,剥夺氧及糖∈焙竽芄荒D馊毖跞毖P陨窬O胞损伤。与正常组相比,缺氧缺血模型组光镜及电镜示耀亡小体存在,线粒体结构异常:鞠胞活力明显担珻免疫细胞化学示阳性率明显增加,膍泶锩飨栽銮俊"谑室伺度痬的外源性神经生杂枘芄淮俳毙律匝跞毖P陨窬O赴薷矗;は吡L濉"跲目的:探讨神经生长因子、痬稍ぷ干预小时谌毖跞毖P∈奔∈焙笥τ肗的神经元细胞活不同时间点凋亡诱导因予—在转录及翻译水平的表达,与正常组及缺氧缺血组进行比较。表达相对含量:。。,±。缺氧缺血组馕舛燃于/的干预组细胞活力随浓度递增而增强,但与缺氧缺血损伤对照组相比无显著性差异。缺氧缺血模型组细胞核形状上,但均不及∈庇靡┬Ч选小时用药优丁小时后曲。.及细胞色素一,猚±,.篊—%,..ィ摘要,,
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童刍研究生签名:董蠢东南大学学位论文使用授权声明期:。:日期:粒焊帷导师签名:复印件和电子文档,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内日或撰写过的研究成果,也不包含为获得东南大学或其它教育机构的学位或证书而使用过东南大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆有权保留本人所送交学位论文的容和纸质论文的内容相一致。除在保密期内的保密论文外,允许论文被查阅和借阅,可以公布ǹ论文的全部或部分内容。论文的公布ǹ授权东南大学研究生院办理。本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,沦文巾不包含其他人已经发表的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。
本论文专用术语拧⒈淞俊⑺趼源实的注释表.....⋯⋯⋯⋯....猧缺氧缺血性脑损伤⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..神经生长因子半胱氨酸天冬氨酸酶⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯反转录聚合酶链反凋己程序性细胞步匕亡凋广诱导引子细胞色素一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.,一,籨四甲基偶氮哗盐..⋯......⋯⋯⋯⋯........⋯.⋯⋯......⋯⋯.狢—猧缩咯词
绪论把神经组织的体外培养是年由首创,年采用胰蛋白酶消求更有效的防治措施,利于我国优生优育国策的执行和民族素质的提高迫在眉睫。动、耗能、受基因调控的死亡过程,作为“能源工厂”的细胞器一线粒体在此过程中发挥致细胞凋亡,①线粒体通透性转变孔丌放,释放促凋亡蛋白:细胞色素一蛲鲇盏家蜃猧促凋亡。②通过反馈效应使第一条途径进。’步放大。③线粒体正常功能丧失直接导致细要给予受损的神经元细胞适当的生长内环境,即予以神经营养因子,受损的神经元细胞是可以再生和修复的。神经生长因予化并用液体培养基方法获得了单层培养细胞:神经组织的分离细胞培养和单层培养法的出现,对神经元细胞培养的发展起了很大的推动作用,己成为人们进行神经领域研究所缺氧缺血性脑损伤—并发症,有较高的发病率和死亡率,也是导致智能落后和脑性瘫痪等儿童伤残的主要原因,不同程度地影响着存活者的生存质量,影响到我国优生优育国策的执行和民族素质的提高。近年来,虽然对该病的研究有诸多进展,但其涉及的相关机理众多且确切发病机理