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自然杀伤细胞联合西妥昔单抗对肠癌细胞体外作用的研究.pdf

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上传人:799474576 2016/2/16 文件大小:0 KB

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文档介绍:1万方数据2目录第一部分自然杀伤细胞联合西妥昔单抗对肠癌细胞体外抑制作用的研究中文摘要3英文摘要4前言6材料8方法10结果16讨论25结论31参考文献32致谢37第二部分抗体依赖细胞介导的细胞毒性抗肿瘤研究进展综述38参考文献43万方数据3自然杀伤细胞联合西妥昔单抗对肠癌细胞体外作用的研究中文摘要目的:通过分别应用自然杀伤(natural killer NK)细胞、西妥昔单抗(cetuximab)以及NK细胞与cetuximab联合对三株肠癌细胞(LoVo细胞、SW480细胞、SW620细胞)体外抑制作用的研究,探讨cetuximab抗肿瘤过程中抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(antibody dependent cell cytotoxicity,)的作用。利用NK细胞表面活化性受体FcγRIII和肿瘤细胞细胞表面EGFR(epidermal growth factor receptor)受体表达为纽带,为cetuximab联合NK细胞的的细胞生物治疗方案提供实验依据。方法:分别通过免疫组织化学方法、流式细胞仪检测三株不同肠癌细胞表面的EGFR表达水平;MTT法分别检测六种不同浓度cetuximab(5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml)作用24h、48h、72h后三株肿瘤细胞的生长抑制情况;利用外周血细胞分离培养NK细胞,分别将NK细胞、cetuximab、NK细胞和cetuximab联合作用于三株不同的肿瘤细胞,采用LDH法检测三组不同因素处理后三株肿瘤细胞的抑制率的改变。结果:免疫组织化学结果,EGFR表达:LoVo(+++),SW480(+),SW620(-);流式细胞仪检测结果(以平均荧光强度MFI表示):LoVo MFI ±,SW480 MFI ±,SW620 MFI ±。cetuximab对LoVo细胞和SW480细胞的抑制率呈正相关,cetuximab对SW620细胞的抑制率无相关性;NK细胞按不同效靶比率加入靶细胞(LoVo细胞、SW480细胞、SW620细胞)后,抑制率均与效靶比呈正相关,NK细胞联合cetuximab对LoVo细胞及SW480细胞具有协同抑制效应,而NK细胞联合cetuximab对SW620细胞具有相加效应。结论:,cetuximab的浓度与对肿瘤细胞的抑制率呈正相关;而cetuximab对EGFR阴性的SW620细胞的抑制不明显,且cetuximab的浓度与对肿瘤细胞的抑制率无相关性;、SW480细胞具有协同抑制效应,功能密切相关;,高EGFR表达的肿瘤细胞更加敏感。万方数据4关键词: The Function of NK Cells Combined With Cetuximab on Colon Cancer Cellsin VitroABSTRACTObjectives: To investigate inhibitory effect ofNK cells biniton effect of NK cells with cetuximab on three colon cancer cells (LoVo、SW480、SW620) in explore the antibody dependent cell cytotoxicity() mechanisms underlying cetuximab's inhibitory effect on colon cancer cells . To makeuse of the FcγRIII of NK cell and (epidermal growth factor receptor)EGFR of tumor cell,we may provide the experimentaldata for cetuximab combined with NK cell cell for biological treatment :We check EGFR expression levels of three differentcolon cancer cells (LoVo, SW480, SW620) by immunohistochemistry,flow cytometry,then six