文档介绍:中国耳鼻咽喉头颈外科/年月,第卷,第期
反义寡核苷酸对喉癌一细胞放疗的增敏作用
屈永涛’,李晓明’,路秀英’,董文荣
白求恩医院耳鼻咽喉头颈外科, 河北石家庄:石家庄市第三医院耳鼻咽喉科,河北石家庄
【摘要】目的探讨在放疗诱导喉癌细胞,,,;
凋亡中的作用以及反义寡核苷酸,
, ,,
殖、凋亡及其放疗敏感性的影响。方法人工合成硫: :一
代,通过脂质体法转染人喉鳞状细胞.
癌一细胞株后,采用:①流式细胞法测定】
转染一细胞的转染率;②法检测基
因转染后的表达情况变化;③流式细胞
仪检测射线照射后细胞凋亡率及蛋白的变化。,
结果①各浓度带标记转染细一.
胞后/\时,取转染细胞制成的单细胞悬液,于流式细一
胞仪进行检查,发现转染效率均为%%;②各浓.
度作用于细胞/\后,均出现.
的表达下调,并呈剂量依赖关系,同时.②
伴有细胞凋亡率的升高;③放疗转—.⑨
染组细胞凋亡率均显著高于单纯放疗组细胞凋亡率
户. ,随着剂量的增加,细胞. ①
凋亡率逐渐增加户.。放疗加转染组细
胞蛋白表达率低于单纯放疗各组细胞蛋,
白表达率.。各实验组与对照组中凋亡率的% % .②
变化与蛋白荧光指数的变化呈负相关。结论,
喉癌细胞对放疗的抵抗作用与蛋白的表达水平,
有关,反义寡核苷酸转染一细胞株能够提高.. ③
细胞对放疗的敏感性。
关键词】喉肿瘤;凋亡抑制蛋白质类:寡核苷酸类,
反义放射疗法,计算机辅助:细胞凋亡..
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尸. .
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第一作者简介及通讯:屈永涛,男,辽宁人,河北医科大学在读医学博士,主治医师,主要研究方向为头颈肿瘤临床及基础。
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通讯作者:李晓明:一.
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中国耳鼻咽喉头颈外科/年月,第卷,第期
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目前,临床公认的针对喉癌的治疗手段主要是以匀分布,置于℃% 培养箱中继续培养。
手术为主,放疗为辅的综合治疗。
的病理学和生物学特点,喉癌组织对放射线治疗属于形态学观察。设立个浓度梯度,即分别取
中度敏感,不同程度的制约了其放射治疗的实际疗效”。、、、/进行转染。分
如何提高肿瘤放射治疗的效果并减少副损伤,提高喉别于转染后/\时取转染细胞吸弃其中培养基,使用
癌的放射敏感性已经成为一个急待解决的问题。现己冷—液洗次,用—配制的%甲醛固定
证明凋亡抑制蛋白的表达不仅与肿瘤的恶性程分钟,,接着用甘油封片液
度、侵袭性、转归有关,还对其放化疗的敏感性密切/磷酸盐、./、%
相关。通过分子生物学手段调节肿瘤细胞内封固于荧光倒置显微镜下观察。另分别于转染后/
表达水平,对改变肿瘤对放化疗的敏感性可能具有重取转染细胞制成单细胞悬液,于流式细胞仪进行检查。
要意义。..法检测表达。将实验分
成五组,取不同浓度进行转染。组:空
白对照组;Ⅱ组:/转染组;:/转
. 细胞和试剂。人喉鳞状细胞癌细胞株一由美染组;组:/转染组;组:/转
国国家癌症研究所病理实验室提供,培养在完全染组。分别于基因转染后/\:集个细胞