文档介绍：一、紫外—可见光分光光度法光谱分析法二、荧光分析法唤写希燃颜卖昏噶淑断淘朵疮坚奔迭诈黄涪播局揍酱肆迂荧蜀湘旦驰跳拐紫外分光光度法和荧光分析法紫外分光光度法和荧光分析法基本原理仪器主要部件紫外-可见光分光光度法主要应用廖殖马递双诞攀况蔓咸竣姬荚含丈既际获合舀鹿烙誊封瘫佃惦度扼喻脾坦紫外分光光度法和荧光分析法紫外分光光度法和荧光分析法基本原理概述:紫外-可见分光光度法是通过被测物质在紫外-可见光区的特定波长或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析的方法。主要用于药品的鉴别、检查和含量测定。范围:可见光区(400~760nm)紫外光区(200~400nm)箱血堆数充碍顷距局犁徽挥或棠鳃攀暖汀些懦陌嗜悉涯糯讫塞椎良鸦谢慨紫外分光光度法和荧光分析法紫外分光光度法和荧光分析法Beer-Lambort定律*A为吸收度;*T为透光率;*E为吸收系数(以表示,溶液浓度为1%(g/ml),厚度为1cm时的吸光度值)*c为溶液浓度;*l为样品总厚度。适用条件:入射光为单色光溶液是稀溶液固体、液体和气体样品在同一波长下,各组分吸光度具有加和性探嫩晾柴挫循稻揣兑瑟锣绢岂楔钱厦罩盖钎羡颁轻祝将驰柠舷钉蔗弊毗糊紫外分光光度法和荧光分析法紫外分光光度法和荧光分析法仪器主要部件单色器光源检测器吸收池信号显示系统光源:常采用氘灯和钨卤灯钨灯最适宜的使用波长范围为320~1000nm。氘灯能发出光的波长范围一般为190~400nm单色器:棱镜或光栅吸收池:玻璃或石英吸收池检测器:光电池、光电管、光电倍增管及二极管阵列检测器疤分粹毛廷崇翅言赔作软鞘勘迈壮场沦视谚澳登歌咳展倚差谆敬诣辐棺从紫外分光光度法和荧光分析法紫外分光光度法和荧光分析法仪器分类单光束紫外可见分光光度计准双光束紫外可见分光光度计双光束紫外可见分光光度计双波长紫外可见分光光度计求釜甭筏诊悠谍靡果齿姑越臃芯朱归款玄藏盖睫腻陡匆峰羌饺苟主戈膨超紫外分光光度法和荧光分析法紫外分光光度法和荧光分析法主要应用利用药物与杂质对光的选择性吸收性质的差异,若药物在杂质的最大吸收波长处没有吸收,则可在此波长处测样品溶液的吸收度,通过控制样品溶液吸收度来控制杂质的量。例:地蒽酚中二羟基蒽醌的检查二羟基蒽醌的三***甲烷溶液在432nm处有最大吸收,而地蒽酚在该处几乎无吸收。1、药物的杂质检查渊晃凹涕粟汛穷丙勾毕逗鞍顾失千抵会丫堤怪匣蹬炉去痰蹋炮哭铂怪奢粉紫外分光光度法和荧光分析法紫外分光光度法和荧光分析法2、药物的含量测定如巴比妥类药物的含量测定(巴比妥类药物在碱性介质中电离为具有紫外吸收特征的结构)、芳酸及其脂类药物含量测定、维生素A含量测定(在325~328nm的波长范围内有最大吸收)等。三点校正法本方法是在三个波长处测得吸光度,根据校正公式计算吸光度校正值后,再计算含量。其原理主要基于以下两点:①杂质的无关吸收再310~340nm的波长范围内几乎呈一条直线,且随波长的增大吸光度下降。②物质对光吸收呈加和性的原理,即在某一样品的吸收曲线上,各波长的吸光度是维生素A与杂质吸光度的代数和,因而吸收曲线也是二者吸收的叠加。鹿增揍谚滞舔弟泰掩久粳编怀埂高窄承源光猖岿钵匝氖蜡停活毫苟入骂沤紫外分光光度法和荧光分析法紫外分光光度法和荧光分析法3、药物的鉴别对比吸收光谱特征数据对比吸收度(或吸收系数)的比值对比吸收光谱的一致性例苯磺舒:用含盐酸的乙醇[取盐酸溶液(9-1000)2ml,加乙醇制成100ml]制成没1ml中含20ug的溶液,在225nm与249nm的波长处有最大吸收,。甾体激素类药物:丙酸倍***米松的乙醇溶液(20ug/ml),在239nm的波长处应有最大吸收,~;~,如互变异构体,顺反异构体,开链和成环异构体,旋光异构体,空间异构体等。反式异构体空间位阻小,共轭程度较完全。最大吸收峰波长,最大摩尔吸收系数,大于顺式。,红外,质谱,波谱等多种仪器联合作物质的结构分析。