文档介绍：郑州大学
硕士学位论文
β淀粉样蛋白25-35对大鼠神经干细胞的毒性和雌激素的保护作
用
姓名:李开荣
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:崔景彬
20030501
矸垩鞍源笫笊窬上赴亩拘院痛萍に氐谋;ぷ饔研究生李开荣师崔景彬郑州大学基础医学院生物化学教研室河南郑州摘要材料与方法导是淀粉样蛋白前体蛋白珹发病中起着至关重要的作用。诘亩拘砸部晌P多因子如雌激素等所拮抗,因此它们在的治疗中发挥着重要作用。本实验从胚胎大鼠脑中分离出神经干细胞,进行体外培养,随后观察了细胞,并加入雌激素的活性形式一贫迹鄄霢陨窬上赴亩拘神经干细胞是一类具有分化为神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞潜能,并能自我增殖的多能干细胞。神经干细胞研究为治疗神经系统疾病开拓了广阔的前景,但它要成功应用于临床,则要取决于其定向诱导分化和疾病局部微环境对神经干细胞的影响的研究。畗碱性成纤维生长因子是研究最为广泛、深入的神经干细胞增殖分化诱导因子,除了具有促增殖作用外,它们在不同培养条件下还能诱导神经干细胞向终末方向分化。雌激素、维甲酸,巧窬低痴7⒂匦氲两种因子,提示它们在神经干细胞分化诱导方面可能也发挥着重要作用。矸垩鞍斐4徊暮霭被岵谢氖杷模删合成不溶的纤维形式或不定型颗粒状结构,导致各种毒性反应,在阿尔茨海默贫肌⑷ǚ词轿姿,直鸲神经干细胞分化的诱导作用;另外,用斓亩拘云蜛—干预神经干和雌激素的保护作用,为神经干细胞治疗进行了积极的探索。从胎龄天的大鼠全脑中分离出神经干细胞,以蚥各/兴糠至言扪G逄逋馀嘌K婧蠼幸韵率笛椋表皮生长因子病’郑州大学年硕士研究生毕业沦文—对胚胎神经可·细胞的毒性和雌激素的保护作用
——塑查堂型坐ぶ饕Jダ俭眯┧坷菏捅诙樗芩咳苄├鹌匏克苄┨猛鼙ぶド实验结果窬上赴ḿ霸鲋衬芰觳雌激素、诱导组均可见、染色阳性的分化细胞。此外,各诱—对神经干细胞的毒性及雌激素的保护作用—萍に刈饔煤笊窬上赴劳雎时浠后,细胞死亡率明显上升,且呈时间倚赖性。小时至小时之间,死亡率上升最快;小时,死亡率几乎不再上升,稳定在%左右。联合加入一贫己螅赴劳雎氏灾档汀拘宰榈蛲鱿赴粜月矢叽ァ培养旌螅〔,旌蠼衝癇庖细胞化学染色,鉴定神经干细胞及其增殖能力。窬上赴盏挤只培养天后,取部分细胞加入终浓度为%的胎牛血清,分为五组,再分别加入以下因子:对照组;椋尤隕痬:组,加入痬;雌激素组,加入贫~疞维甲酸组,加入/。继续培养欤婧蠼蠱疫细胞化学染色分别观察诱导分化结果。逋馀嘌旌螅〔糠窒赴尤氩缓琤龊珽痬的无血清培养基,分为三组:对照组;.毒性组加入/的凝聚态.:雌激素保护组同时加入/的凝聚态—雌二醇。以上三组细胞继续培养,并于第∈碧ㄅ卫染色,计数细胞死亡率。小时后,各组细胞进行以下实验:ǖ蛲鲂态学检测;检测、膍泶铮籅疫细胞化学染色检测神经干细胞增殖分化。培养十天后,所有细胞均为阳性细胞;免疫细胞化学染色可见阳性细胞存在。对照组几乎无、阳性细胞,而导因子作用组、染色阳性细胞率无明显差别。加入—萍に刈饔煤蟮蛲鲂翁Ъ觳对照组几乎未见凋亡细胞;雌激素保护组可见凋亡细胞,但比例少于毒—萍に刈饔煤蟮蛲鱿喙鼗騜一琤表达—和性处理组;.和。疞瓵。
塑丛查堂笙硕士研褒些业论文淀粉样蛋白—雌激素结论关键词:神经干细胞增殖分化表皮生长因子碱性成纤维生长因子维甲酸细胞凋亡对照处理组均无表达;雌激素保护组及斜泶铮籄—萍に刈饔煤笙赴鲋衬芰觳染色:对照组和雌激素保护组均可见阳性细胞;痛萍に亍⑷ǚ词轿姿嵩诤G迮嘌芯纱俳神经干细胞向神经元、星形胶质细胞方向分化。方向分化,对神经干细胞向星形胶质细胞方向分化没有抑制作用。化的抑制作用,但不能促进被种频纳窬上赴指丛鲋衬芰Α拘宰榻鲇写俚蛲龌騜表达,而无凋亡抑制基因表达。虯对照组神经干细胞阳性细胞率约为%;雌激素保护组及性组几乎未见阳性细胞。萍に刈饔煤笙赴只觳狻性组则未见阳性细胞;拘宰椤⒋萍に乇;,促进凋亡,—对神经干细胞的促凋亡作用,这与它促进凋亡抑制基因表达有关;雌激素还能逆转陨窬上赴蛏窬7染色;对照组、胞。
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