文档介绍：中国协和医科大学
博士学位论文
一个中国人Fabry病家系致病基因初步研究
姓名:唐历华
申请学位级别:博士
专业:皮肤病与性病学
指导教师:王宝玺
中文摘要∮置致匝9芙侵柿觯且恢中匀旧逡砸糯ḿ膊。此病在男性半合子及女性杂合子中临床表现不同。男性患者常表现有典型的血管角质瘤,肢端疼痛,角膜浑浊以及病情进展到后期的心、。肾、神经系统表现,而女性杂合子则常常无症状。组织病理显示病变组织中毛细血管和中小血管壁中有空泡状细胞,电镜下可见到层状体是其特,征【”。以往的研究表明溶酶体水解酶Ⅱ一半乳糖苷酶钚圆糠只蛉ú缺失所致的糖鞘脂在各组织体液中沉积与〉姆⒉∮泄豏"蛞半乳糖苷酶蒅基因所编码,=年来的研究发现,』颊呒捌浼易宄稍敝写嬖诙嘀址绞降幕蛲变,包括无意突变、错意突变、剪接位点突变、基因重排、缺失和插入等。同时,大量研究资料证实≈虏』蚨辔1嗦肭幕点突变,突变热点位于二核苷酸嗦肭绕涫敲苈胱和但也有少数学者报道,并未在典型』颊呒捌浼易宄稍敝屑觳獾突变,而有蚧蜃B糾较陆担蛘呓鲈诨蜃槟含子发现序列突变。在本次研究中,我们收集到一个中国人〖蚁档难1瓯尽该患者家系祖籍河南省驻马店市新蔡县,有临床病理诊断明确的病患者耍淳な档目赡芑颊人,正常人人。我们根据文献设计合成了哉攵訥基因鐾庀宰拥腜引物,分别以先证者及其家系成员,以及6哉照叩耐庵苎W韵赴鸇为模版进行基因扩增,并对扩增产物进行分析及苯硬庑颉=峁
显示此颊咭约凹蚁党稍钡腟枷窈虳序列与正常对照本例』颊呦日髡呔哂械湫偷牧俅埠妥橹±硌Ъ觳樘氐悖但是在该患者及其家系成员中并未检测到任何蛲庀宰幽诘耐变,尽管国外文献也有类似的报告,但是仍然属于特殊病例。探讨病患者不存在虮嗦肭庀宰幽谕槐涠⒉〉幕疲嬖谝韵几种可能:⒆B嫉骺厍蛲槐洌、庸ふ习槐洌、裂解信号突变;纬珊笕毕荩、抑制蛋白或水解蛋白功能结构异常。今后需要对此』颊呒凹蚁党稍苯衋一半乳糖苷酶子序列测定,。以进一步明确病因。关键词:颍琎一半乳糖苷酶現病,单链构象多态性,无差异。钚约觳猓珿基因表达水平测定,以及分析和内含基因突变
“,,琽,‘.,瑃,痵,,。·‘
..’,。,篏,現瑂琺。。。。
英文缩略语酸性柠檬酸钠葡萄糖溶液过硫酸铵三磷酸腺苷脱氧核昔三磷酸溴化乙锭乙二胺四乙酸聚丙烯酰胺凝胶泳聚合酶链式反应十二烷基磺酸钠单链构像多态性三羟甲基氨基甲烷碱基对琋,琋。一四甲基乙二胺琋,琋
前言∮殖泼致匝9芙侵柿觯且恢趾奔膞染色体隐性遗传的代谢性疾病。本病最早由德国学者陀⒐薃直鹩表现为严重的多系统损害【,主要包括四肢痛,少汗,血管角质瘤,角膜混浊,以及心、肾、中枢神经系统的血管病变。对比之下,多数杂合子女性无临床表现或仅有角膜浑浊等轻度症状,但其中%也常有一个或多个器官的严重损害,但是这种现象的发生机制尚不清楚。此病的主要病理组织学特征是毛细血管、中小血管壁中有空泡状细胞,电镜下可见层状体。近来的研究均证明∈,使糖鞘脂在各种组织和体液中沉积而产生各种临床症状。通过原位杂交技术已经证明Ⅱ一半乳糖苷酶蛭挥赬戎赋觯薗一半乳糖苷酶只有一个编码话肴樘擒酶目7旁亩燎鹩籄,止于位嗦氚个氨基酸信号肽的霭被嶙槌傻腝一半乳糖苷酶K怪赋所有的。一半乳糖苷酶哂幸桓龇浅6痰’未翻译区并且缺乏多腺嘌呤信号。这是人类核编码中的唯一例外。编码区终止密码子后为多腺嘌呤信号区【俊摹R话肴樘擒酶蜃镈包含的’侧翼序列,由鐾显子和瞿诤幼槌审疛。所有的内含子、外显子接合遵循/一致原则。话肴樘擒彰窤基因嘁硇蛄邪⊿,衅舳瓯ǖ馈;颊咧写蟛糠职牒献幽谢加诙诨蚯啻浩诜⒉。和
以及与激动蛋白、和核心增强子相称的序列】。外显子ú’未翻译区,编码信号肽和成熟酶前个残基。内含子桓龇嵌嗵的重复区,并且在插入序列和嘁硇列共有个馗匆蜃印U个核苷酸的中间重复序列组成了一半乳糖苷酶虻ァR虼耍琌一半乳糖苷酶蚴怯涤凶迄今为止,有关蛲槐涞难芯恳逊⑾指髦值贾翭病的突变方式,由此使之编码蛋白质功能丧失而引起疾病。已报道的基因突变的位点遍布整个基因,外显子为热点区域。此外,尚有一些在典型』颊呒捌浼易宄稍敝形醇觳獾交蛲槐洌蠫基因转录水平下降的报道,以及在基因组内含子内发现基因突变的报道。过去的研究资料主要来源于欧美地区人群以及日本入资料,台湾等【曾在两个无关中国人』颊咛迥谥な低庀宰觢的最后一个核苷酸猚的转换。这是中国人』颊呋蛲变的首例报道,中国大陆尚无关于』蜓芯康谋ǖ馈NA颂峁更多的关于蛲槐涞男畔ⅲ颐茄芯苛艘桓鲋泄薋病家系的蛲槐涮卣鳌多幕蛑唬疜
第一部分临床病例与家系调查资料一、临床资料:先证者临床资料:先证者为一岁男性,汉族,祖籍河南省驻马店市新蔡县,于年赵诒