文档介绍:、基因工程的“基本工具”,并且使每一条链中的两个核苷酸之间的断开(切割DNA分子):::二、基因工程的“基本工具”形成平未端(SmaI)及黏性未端(EcoRI)——“分子缝合针”种类来源作用部位连接末端连接对象E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶大肠杆菌T4噬菌体磷酸二酯键黏性末端黏性末端和平末端DN***段种类项目限制酶DNA连接酶DNA聚合酶解旋酶作用底物作用部位作用特点作用结果DNA分子DNA分子片段脱氧核苷酸DNA分子磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键碱基对间的氢键切割目的基因及载体,能专一性识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开将双链DN***段“缝合”起来,恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上将DNA两条链之间的氢键打开形成黏性末端或平末端形成重组DNA分子形成新的DNA分子形成单链DNA分子下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化,图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是( )A.①②③④ B.①②④③C.①④②③ D.①④③②C据右图所示,有关工具酶功能的叙述不正确的是( ),——运载体(1)作用:将目的基因送入受体细胞(2)具备的条件:,,、噬菌体、动植物病毒(3)种类:质粒——细菌拟核DNA之外结构简单、能自主复制的很小的环状DNA分子。特别提醒一般来说,天然载体往往不能满足人类的所有要求,因此人们根据不同的目的和需要,对某些天然的载体进行人工改造限制酶切割位点所处的位置必须是在所需的标记基因之外,这样才能保证标记基因的完整性,有利于对目的记忆的检测。二、基因工程的基本操作程序(步骤)获取目的基因构建表达载体导入受体细胞目的基因检测与鉴定第一步第二步第三步第四步(一)(2).从基因文库中获取目的基因1)基因组文库(鸟枪法)提取某生物全部DNA用适当限制酶切割许多DN***:主要是指编码蛋白质的基因2)部分基因文库(CDNA)(1).从供体细胞直接提取