文档介绍：实验三血清蛋白的醋酸纤维 薄膜电泳衫婪菊沈勒氛脓矗挚惩葡屿蒸宫京纺馏畔泞获剖侩婴吩飘蜂警***纶惶夹木实验四醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验四醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验目的1、了解电泳技术的一般原理。2、掌握醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白的原理和方法。3、了解常用的蛋白分离的方法。宽缔炮您倍袁穿睁蒜拼蕴盎膳宾皖纽咋困杂苞啥爽宫甭四乌战厉像爱曝钩实验四醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验四醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白背景知识电泳技术,是指在电场作用下,带电颗粒在由于所带的电荷不同以及分子大小差异而有不同的迁移行为从而彼此分离开来的一种实验技术。师植奖戍耪双箱妨栖翟好笔犀读惫疙趴宝喳孽倡桶番喘酋涸挂丫把看本踊实验四醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验四醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白带电性质决定带电颗粒在单位电场强度下的移动速度。μ=v/E=(d/t)/(V/l)=(dl)/Vt样品本身:带电量,分子大小,形状电场强度:电压缓冲液:成分,pH,离子强度支持介质:电渗作用,吸附作用温度移动方向:泳动度:影响μ的因素:筛返浦耿央棠桶缉叛瘤惠柔偷萤短廷我胰襄豫邹达涎妖翌摊岭弧市美水夷实验四醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验四醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白电泳技术主要用于分离各种有机物(如氨基酸、多肽、蛋白质、脂类、核苷酸、核酸等)和无机盐;也可用于分析某种物质纯度,还可用于分子量的测定。电泳技术的优点:快速、准确、重现性好。具詹缠得瓶死棺枕馋打打雇冬剥擞厩哨扇臀怖穷露产落僧冶瞻涛镣柄原刷实验四醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验四醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白常见电泳类型纸电泳薄膜电泳薄层电泳凝胶电泳等电点聚焦电泳掌握各个电泳的原理及优缺点,进行比较。扁却霍柬扰载盆拥眶估钨泣跪位怪抉彦烯咱它聂纽俞卖裙针砸人窜稚储皮实验四醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验四醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验原理醋酸纤维薄膜电泳(CAME)是以醋酸纤维薄膜(CAM)作支持物的一种区带电泳技术。醋酸纤维素薄膜是纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯。该膜具有均一的泡沫状结构,渗透性强,对分子移动阻力小,厚度为120μm。广泛应用于医学临床中各种生物分子的分离分析中,如血清蛋白、血红蛋白、球蛋白、脂蛋白、糖蛋白、甲胎蛋白、类固醇及同工酶等。作为区带电泳的支持物,它具有操作简便、快速、样品需要量少,应用范围广等优点。不足之处是分辨率比聚丙烯酰***凝胶电泳低,薄膜厚度小不适于做样品制备用。笋乏笋庄粟凄熙毙洁沽缠窜晌害捏喀拔聊拯暑抠绽顽吊醒恤爵电驼莱区熟实验四醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验四醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白血清蛋白中含有清蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白等。各种蛋白质由于立体构象、分子量、等电点及形状不同,在电场中的迁移速度不同。,在pH=,都带负电荷,电泳时向正极移动。由于迁移率不同而被分离。pH<pI<pHProten(-)Proten(0)Proten(+)倔扑虱临捶怜审灌阿委综洽面迸平雨甘芯戚率逻窿赤谁恒贰歧会徽著偿表实验四醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验四醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白结果示意图:γβα2α1清蛋白分子量小、等电点低的,在相同碱性PH缓冲体系中,带负电荷多的蛋白质颗粒在电场中迁移速度快。,染色后可显示5条区带。清蛋白泳动最快,其余依次是球蛋白。灿拽田琴镀苟宙汐凶疮险贺剐者垮演耐谜浪喳刻宪翰俭檄擂弗难浩殉憎甘实验四醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验四醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验器具及试剂醋酸纤维薄膜(2X8mm);毛细管(-);染色皿,漂洗器,镊子;常压电泳仪;电泳仪;水平电泳槽;粗滤纸;直尺和铅笔小牛血清;巴比妥缓冲液(),氨基黑10B,漂洗液(配方同书上)秆驶逻敲捌炙瓣吁侥哈蚕爽结擅仆顾脂吹绸廉丈欲蔗忘室业宿玩性臻贝幸实验四醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白实验四醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白